Abstract objective This study intends to explore the role of PI3K-AKT signaling pathway in the effect of Puerarin on the proliferation, activity, and function of osteoclasts from the perspective of antioxidation. Methods RAW264. 7 cells were divided into control group, induction group treated with 20ng/mL M-CSF and 50ng/mL RANKL, puerarin group treated with 20ng/mL M-CSF, 50ng/mL RANKL, and 50μmol/L puerarin. The staining of osteoclasts before and after puerarin intervention was measured by TRAP staining and cell count. The changes of related molecules before and after puerarin intervention in osteoclasts were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western Blot, including TRAP, MMP-9, Cathepsin K, NFATc1, PTEN, Catalase, PI3K, AKT, P-AKT(ser473), FoxO1, P-FoxO1. Results TRAP staining showed that puerarin inhibited the proliferation and differentiation of RAW264.7 cells into osteoclasts. The results of qRT-PCR and WB showed that compared with the control group, the gene expression of TRAP, MMP-9, cathepsin K and NFATc1 in the induction group was up-regulated, while the gene expression of Catalase was down-regulated. PTEN gene had no significant changes before and after puerarin intervention. The expression of P-AKT (ser473) and NFATc1 protein was up-regulated, while the expression of PI3K and AKT protein had no change. Compared with the induction group, the gene expression of TRAP, MMP-9, Cathepsin K, and NFATc1 in the puerarin group decreased, the gene expression of Catalase increased, the protein expression of PI3K and AKT remained unchanged, the protein expression of P-AKT (ser473), P-FoxO1 and NFATc1 decreased, and the protein expression of FoxO1 and Catalase increased. Conclusion Puerarin may promote the transcriptional activity of FoxO1, increase the expression of catalase protein and exert its antioxidant activity by regulating the PI3K-AKT signal pathway, so as to inhibit the proliferation and differentiation of osteoclasts.

Arsenic is a grade l human carcinogen that can cause kinds of damage to the body.The heart is one of the main target organs of arsenic damage,but the preventive and curative measures underlying arsenic poisoning are not clear.To investigate the effect of tanshinone llA sulfonate on the injury of H9C2 cardiomyocytes induced by NaAsO2,H9C2 cardiomyocyteswere divided into four groups where control group with general medium,arsenic group received sodium arsenite which containing general medium,STS pretreatment and As group and finally the STS alone group.Compared with the control group,different concentrations of STS had no significant effect on the cell viability; Compared with the control group,there was no significant change in the viability of cells treated with arsenic for 12 h after STS pretreatment for 6h,the viability of cells treated with NaAsO2 alone was decreased;Compared with the control group,the cell viability was decreased after STS pretreatment for 12h and arsenic for 24h,the cell viability of NaAsO2 group was also decreased,the viability of NaAsO2 cells was lower than that of STS pretreated for 12h with NaAsO2 for 24h.The content of Caspase 3 and 7 in the NaAsO2 group was higher than that in the STS and NaAsO2 group and the Control group and STS group after 12h,the differences were statistically significan.After STS pretreatment for 12h and NaAsO2 for 24h,there was no significant difference in Caspase 8 content between NaAsO2 group and other groups;As a result,Sodium tanshinone llA sulfonate can attenuate the injury of H9C2 cardiomyocytes induced by sodium arsenite.