The developmental plasticity of the root system plays an essential role in the adaptation of plants to the environment. Among many other signals, auxin and its directional, intercellular transport are critical in regulating root growth and development. In particular, the PIN-FORMED2 (PIN2) auxin exporter acts as a key regulator of root gravitropic growth. Multiple regulators have been reported to be involved in PIN2-mediated root growth; however, our information remains incomplete. Here, we identified ROWY Bro1-domain proteins as important regulators of PIN2 sorting control. Genetic analysis revealed that Arabidopsis rowy1 single mutants and higher-order rowy1 rowy2 rowy3 triple mutants presented a wavy root growth phenotype. Cell biological experiments revealed that ROWY1 and PIN2 colocalized to the apical side of the plasma membrane in the root epidermis and that ROWYs are required for correct PM targeting of PIN2. In addition, ROWYs also affected PIN3 protein abundance in the stele, suggesting the potential involvement of additional PIN transporters as well as other proteins. A global transcriptome analysis revealed that ROWY genes are involved in the Fe

Abstract The phytohormone auxin plays central roles in many growth and developmental processes in plants. Development of chemical tools targeting the auxin pathway is useful for both plant biology and agriculture. Here we uncover that Naproxen, a synthetic compound with anti-inflammatory activity in humans, acts as an auxin transport inhibitor targeting PIN transporters in plants. Physiological experiments indicate that exogenous Naproxen treatment affects pleiotropic auxin-regulated developmental processes. Further cellular and biochemical evidence supports that Naproxen suppresses auxin transport, specifically PIN-mediated auxin efflux. Moreover, biochemical and structural analysis confirms that Naproxen binds directly to PIN1 protein, via the same binding cavity as the IAA substrate. Thus, by combining cellular, biochemical, and structural approaches, this study well establishes that Naproxen is a PIN inhibitor and elucidates the underlying mechanisms. Further use of the compound may advance our understanding on the molecular mechanisms of PIN-mediated auxin transport, and expand our toolkit in auxin biology and agriculture.