Real-time streaming of audiovisual content over the Internet is emerging as an important technology area in multimedia communications. Due to the wide variation of available bandwidth over Internet sessions, there is a need for scalable video coding methods and (corresponding) flexible streaming approaches that are capable of adapting to changing network conditions in real time. In this paper, we describe a new scalable video-coding framework that has been adopted recently by the MPEG-4 video standard. This new MPEG-4 video approach, which is known as Fine-Granular-Scalability (FGS), consists of a rich set of video coding tools that support quality (i.e., SNR), temporal, and hybrid temporal-SNR scalabilities. Moreover, one of the desired features of the MPEG-J FGS method is its simplicity and flexibility in supporting unicast and multicast streaming applications over IF.

Background and aimsDefective autophagy has been proposed as an important event in a growing number of autoimmune and inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis and lupus. However, the precise role of mechanistic target of rapamycin (mTOR)-dependent autophagy and its underlying regulatory mechanisms in the intestinal epithelium in response to inflammation and oxidative stress remain poorly understood.MethodsThe levels of p-mTOR, LC3B, p62 and autophagy in mice and LPS-treated cells were examined by immunoblotting, immunohistochemistry, confocal microscopy and transmission electron microscopy (TEM). We evaluated the expression of IL-1β, IL-8, TNF-α, MDA, SOD and T-AOC by quantitative real time-polymerase chain reaction (qRT-PCR) and commercially available kits after silencing of mTOR and ATG5. In vivo modulation of mTOR and autophagy was achieved by using AZD8055, rapamycin and 3-methyladenine. Finally, to verify the involvement of TLR4 signalling and the NF-κB pathway in cells and active ulcerative colitis (UC) patients, immunofluorescence, qRT-PCR, immunoblotting and TEM were performed to determine TLR4 signalling relevance to autophagy and inflammation.ResultsThe mTOR-dependent autophagic flux impairment in a murine model of colitis, human intestinal epithelial cells and active UC patients is probably regulated by TLR4-MyD88-MAPK signalling and the NF-κB pathway. Silencing mTOR remarkably attenuated, whereas inhibiting ATG5 aggravated, LPS-induced inflammation and oxidative injury. Pharmacological administration of mTOR inhibitors and autophagy stimulators markedly ameliorated experimental colitis and oxidative stress in vivo.ConclusionsOur findings not only shed light on the regulatory mechanism of mTOR-dependent autophagy, but also provided potential therapeutic targets for intestinal inflammatory diseases such as refractory inflammatory bowel disease.

Abstract We describe the design, kinetic properties, and structures of engineered subtilisin proteases that degrade the active form of RAS by cleaving a conserved sequence in switch 2. RAS is a signaling protein that, when mutated, drives a third of human cancers. To generate high specificity for the RAS target sequence, the active site was modified to be dependent on a cofactor (imidazole or nitrite) and protease sub-sites were engineered to create a linkage between substrate and cofactor binding. Selective proteolysis of active RAS arises from a 2-step process wherein sub-site interactions promote productive binding of the cofactor, enabling cleavage. Proteases engineered in this way specifically cleave active RAS in vitro , deplete the level of RAS in a bacterial reporter system, and also degrade RAS in human cell culture. Although these proteases target active RAS, the underlying design principles are fundamental and will be adaptable to many target proteins.

Attenuated DNA repair leads to genomic instability and tumorigenesis. BRCA1/BARD1 are the best known tumor suppressors that promote homology recombination (HR) and arrest cell cycle at G2/M checkpoint. As E3 ubiquitin ligases, their ubiquitinase activity has been known to involve in the HR and tumor suppression, but the mechanism remains ambiguous. Here, we demonstrated upon genotoxic stress, BRCA1 together with BARD1 catalyzed the K48 ployubiquitination on LARP7, a 7SK RNA binding protein known to control RNAPII pausing, and thereby degraded it through 26S ubiquitin-proteasome pathway. Depleting LARP7 suppressed the expression of CDK1 complex, arrested cell at G2/M DNA damage checkpoint and reduced BRCA2 phosphorylation which thereby facilitated RAD51 recruitment to damaged DNA to enhance HR. Importantly, LARP7 depletion observed in breast patients lead to the chemoradiotherapy resistance both in vitro and in vivo. Together, this study unveils a mechanism by which BRCA1/BARD1 utilizes their E3 ligase activity to control HR and cell cycle, and highlights LARP7 as a potential target for cancer prevention and therapy.

Boronic acids have been widely applied in various biological fields, particularly achieving significant practical progress in boronic acid–based glucose sensing. However, boronic acids exhibit nonspecific binding to other nucleophiles, and the inherent lability of boronic esters in biological systems limits their further applications. Herein, we developed a stimuli-responsive controllable caging strategy to achieve photoresponsive spatiotemporally and nitroreductase-responsive cancer cell-selective glucose sensing. We introduced o-/p-nitroaryl-containing self-immolative linkers onto δ-pinanediol derivatives, effectively caging boronic acids and blocking glucose recognition. Upon triggering by specific stimuli, the caged boronic esters decompose, releasing boronic acids and thereby restoring glucose recognition of the diboronic acid–based sensor. The proof of concept was confirmed through intracellular glucose bioimaging in living cells. Upon regional UV irradiation, we could monitor intracellular glucose with excellent spatiotemporal selectivity. Furthermore, we used the cancer biomarker nitroreductases as the internal stimuli and utilized the caged glucose sensor to selectively label hypoxic cancer cells in a cocultured living cell sample. We believe that our stimuli-responsive caging strategies will hold promising potential for the controlled release of other boronic acids in various biological contexts.