AML is an aggressive malignancy of immature myeloid progenitor cells. Discovering effective treatments for AML through cell differentiation and anti-proliferation remains a significant challenge. Building on previous studies on CDK2 PROTACs with differentiation-inducing properties, this research aims to enhance CDKs degradation through structural optimization to facilitate the differentiation and inhibit the proliferation of AML cells. Compound C3, featuring a 4-methylpiperidine ring linker, effectively degraded CDK2 with a DC

DJ-1 is a multi-functional protein related to cancer and autosomal early-onset Parkinson disease (PD). Besides the well-documented antioxidative stress activity, recent studies suggest that DJ-1 has the deglycation enzymatic activity and the anti-ferroptosis function. Although it has been demonstrated that DJ-1 forms the homodimerization, which dictates its antioxidative stress activity, the relationship between the dimeric structure and newly reported activities remains largely elusive. In this study, we find that the deletion mutation of the last 3 amino acids at C terminus of DJ-1 disrupts its homodimerization in both transfected and purified DJ-1 protein. Further study shows that hydrophobic L187 residue is of great importance for DJ-1 homodimerization. In addition, the ability in methylglyoxal detoxification is almost abolished in the mutation of deleting last 3 residues at C terminus (ΔC3) and point mutant L187E compared with wild type DJ-1 (DJ-1 WT). We also find that the suppression of ferroptosis is fully inhibited by ΔC3 and L187E while partially suppressed by V51C. Thus, our findings show that C terminus of DJ-1 is crucial for its homodimerization, deglycation activity and suppression of ferroptosis.

Abstract The dysregulation of transcription factors is widely associated with tumorigenesis. As the most well-defined transcription factor in multiple types of cancer, c-Myc can directly transform cells by transactivating various downstream genes. Given that there is no effective way to directly inhibit c-Myc, c-Myc targeting strategies based on its regulatory mechanism hold great potential for cancer therapy. In this study, we found that WSB1, a direct target gene of c-Myc, can positively regulate c-Myc expression, which forms a feedforward circuit promoting cancer development. Luciferase-based promoter activity assays and RNA sequencing results confirmed that WSB1 promoted c-Myc expression through the β-catenin pathway. Mechanistically, WSB1 affected β-catenin destruction complex-PPP2CA assembly and E3 ubiquitin ligase adaptor β-TRCP recruitment, which inhibited the ubiquitination of β-catenin and subsequently transactivated c-Myc. Of interest, the promoting effect of WSB1 on c-Myc was independent of its E3 ligase activity. Moreover, co-expression of WSB1 and c-Myc strongly enhanced the initiation and progression of tumours both in vitro and in vivo . Thus, our findings revealed a novel mechanism involved in tumorigenesis in which the WSB1/c-Myc feedforward circuit played an essential role, highlighting a potential c-Myc intervention strategy in cancer treatment.

The tedious synthesis and limited throughput biological evaluation remain a great challenge for discovering new proteolysis targeting chimera (PROTAC). To rapidly identify potential PROTAC lead compounds, we report a platform named Auto-RapTAC. Based on the modular characteristic of the PROTAC molecule, a streamlined workflow that integrates lab automation with "click chemistry" joint building-block libraries was constructed. This facilitates the autonomous generation of a variety of PROTACs, each with distinct linkers and E3 ligase ligands, all stored in biocompatible solutions. The ready-for-screening (R4S) approach, when paired with fluorescence-based assays, enables the efficient assessment of the PROTAC degradation activity in a high-throughput manner. To further test the capability of the platform, we identify six new PROTACs that target CDK2, CDK12, and BCL6 within a mere 8-day time frame for each target. In all, this platform could find broad application not only in discovering new PROTACs but also in the rapid development of novel heterobifunctional modalities.