Abstract Background In the early stages of the coronavirus disease pandemic, the anti-malarial drug hydroxychloroquine (HCQ) and the antibiotic drug azithromycin (AZM) were widely used as emerging treatments. However, controversial cardiac toxicity results obtained from clinical trials and epidemic studies suggest that the cardiotoxicity of these two drugs should be re-evaluated. In the present study, we aimed to assess the impact of a short course of AZM or HCQ + AZM combination treatment on ECG and cardiac function in healthy guinea pigs. Methods Thirty-two male guinea pigs were randomly divided into four groups: control; AZM; HCQ; and HCQ + AZM groups. At 3, 6, and 9 days after treatment, electrocardiograms (ECGs) and echocardiographic techniques were used to determine important ECG parameters and cardiac functional parameters of the left ventricle (including posterior wall thickness, end systolic/end diastolic volume, ejection fraction, and fractional shortening). Results Although AZM decreased the heart rates of guinea pigs on day 9 (under anesthetized conditions), HCQ + AZM decreased heart rates on days 3, 6, and 9. The corrected QT intervals of guinea pigs after AZM and HCQ + AZM treatments were significantly increased, compared with CON and HCQ treatment respectively, on days 3, 6, and 9. However, QRS complex durations were not significantly different between the groups. AZM significantly decreased left ventricular ejection fraction (LVEF) and left ventricular fraction shortening (LVFS) on days 3, 6, and 9, whereas HCQ + AZM only decreased LVEF and LVFS on day 9. Posterior wall thickness and of the left ventricle in the diastolic and systolic states were not significantly different between these groups. In addition, compared with CON, AZM and HCQ decreased the EDV. And, in comparison with HCQ treatment, HCQ + AZM treatment increased ESV on day 9. Conclusions According to our study, AZM significantly prolongs the QT interval and damages cardiac function. Moreover, HCQ + AZM treatment increased the risk of cardiac dysfunction compared with HCQ treatment.

Abstract Objective This study aimed to develop a multiplex suspension assay for the simultaneous quantitative detection of anti-cysteine-rich domain (anti-CysR)/C-type lectin domain 1 (CTLD1)/C-type lectin domain 6–8 (CTLD678)-IgG4 antibodies of M-type phospholipase A2 receptor (PLA2R) in the serum samples of patients to evaluate the clinical application value of PLA2R epitope spreading in disease prognosis. Methods CysR, CTLD1, and CTLD678 antigen domains were coupled to three types of microspheres. The optimal dilution ratio of biotinylated anti-human IgG4 was identified, and a multiplex suspension assay was evaluated in terms of linearity, sensitivity, precision, specificity, and recovery rate. Lastly, the relationship between epitope spreading and the severity of idiopathic membranous nephropathy (IMN) was evaluated. Results The content of all three epitopes could be detected simultaneously within two hours. The intra-assay precision ranged from 4.74% to 9.48% , and the inter-assay precision was between 5.13% and 13.92% . Specific experiments showed that the human IgA antibody did not cause a cross-reaction. The recovery rates ranged between 90% and 100%. The cut-off values of epitopes CysR, CTLD1 and CTLD678 between healthy individuals and patients were 6.30, 12.38, and 10.06 Ru/mL, respectively. Among them, the positive rates of epitopes CysR, CTLD1 and CTLD678 were 100%, 34%, and 75%, respectively. In addition, group 3 (CTLD1 response) accounted for 73% of the twelve patients who were not in remission. Meanwhile, When the concentration of CTLD1 exceeds 42.76 Ru/mL, the patient's prognosis may be poorer. Conclusion A multiplex suspension assay was developed for the simultaneous quantitative detection of anti-CysR/CTLD1/CTLD678-IgG4 antibodies. The epitope migration sequence of PLA2R molecules during disease progression may not follow a simple linear rule. Among them, the epitope CTLD1 is likely to exert the most significant influence on patient remission.