Abstract The Guana-Tolomato-Matanzas (GTM) system is a relatively pristine and well-flushed estuary in Northeastern Florida, USA and characterized as having an extraordinarily high abundance of oysters. Historically, dense populations of oysters, such as those found in GTM, are believed to play an important role in water filtration; however, few biofiltration studies have had access to such pristine populations. To quantify the filtration service (FS) of Eastern oysters (Crassostrea virginica) in GTM at several spatial scales (i.e. reef, watershed, estuary), we implemented a model that solves for the hydrodynamics and depletion of particulate matter passing over model oyster populations, the latter of which were derived from detailed bay-wide surveys. The model results suggested that oyster reefs populating the GTM play an important role in water quality by filtering ~60% of the estuary’s volume within its residence time. Our approach teases apart the role of reef size, residence time, particle concentration, and other physical factors on the generation of FS at different spatial scales. Downstream effects were found to be very important for estuary FS , which depend on the spatial distribution of the reefs in the GTM and local and estuarine-scale hydrodynamics. Therefore, the difference between “realized” FS and the “potential” FS of a given reef may be substantial when considering the complex hydrodynamic and connectivity among populations at several scales. Our model results provide clear and actionable information for management of these oyster populations and conservation of their ecosystem services.