Abstract Gene transfer into human and murine T-cells using viral-based approaches has several promising therapeutic applications including the production of chimeric antigen receptor T-cell (CAR-T) therapy. The generation of murine CAR-T is paramount to test and validate immunocompetent mouse models for CAR-T therapy. Several viral transduction enhancers already exist for gene therapy with few limitations. In this study, we tested vectofusin-1, a short cationic peptide, as a soluble transduction enhancer for gammaretroviral transduction for the generation of anti-CD19 murine CAR-T. We found that in comparison to Retronectin, Vectofusin-1 is an equally optimal transduction enhancer for the generation of murine CAR-T cells.

Abstract To explore the role of clonal hematopoiesis (CH) on chimeric antigen receptor (CAR) T-cell therapy outcomes, we performed targeted deep-sequencing on 114 large B-cell lymphoma patients treated with anti-CD19 CAR T-cells. We detected CH in 42 (36.8%) pre-treatment patient samples, most frequently in PPM1D (19/114) and TP53 (13/114) genes. The incidence of grade ≥3 immune-effector cell-associated neurotoxicity syndrome (ICANS) was higher in CH-positive patients compared to CH-negative patients (45.2% vs. 25.0%, p=0.038). Higher toxicities with CH were primarily driven by three CH genes, DNMT3A, TET2 and ASXL1 (DTA mutations). The incidence of grade ≥3 ICANS [58.9% vs. 25%, p=0.02] and grade ≥3 cytokine release syndrome [17.7% vs. 4.2%, p=0.08] were higher in patients with DTA mutations than those without CH. The estimated 24-month cumulative incidence of therapy-related myeloid neoplasms after CAR-T therapy was higher in patients with CH than those without CH (19% [95%CI: 5.5-38.7] vs. 4.2% [95%CI: 0.3-18.4], p=0.028). Statement of Significance Our study reveals that clonal hematopoiesis mutations, especially those associated with inflammation ( DNMT3A, TET2, ASXL1 ), are associated with severe grade toxicities in lymphoma patients receiving anti-CD19 chimeric antigen receptor therapy. Further studies to investigate the mechanisms and interventions to improve toxicities in the context of CH are warranted.

Chimeric antigen receptor T-cell (CAR-T) therapy, despite being a potentially curative therapy in relapsed or refractory (RR) large B-cell lymphoma (LBCL), remains underutilized in older patients due to limited clinical data. We therefore studied the safety and efficacy of CAR-T therapy in older patients with RR LBCL in the real-world setting. Patients aged ≥65 years with RR LBCL, treated with anti-CD19 CAR-T therapy at 7 US institutions were included in this multicenter, retrospective, observational study. In total, 226 patients were included. Median age at infusion was 71 years (range 65-89). Best objective and complete response rates were 86% and 62%, respectively. Median follow-up after infusion was 18.3 months. The median progression-free survival (PFS) was 6.9 months, with 6- and 12-month PFS estimates of 54% and 44%, respectively. The nonrelapse mortality (NRM) rate was 10.9% at day 180, primarily due to infections, and not impacted by the age groups. Grade ≥3 cytokine release syndrome and neurotoxicity occurred in 7% and 26%, respectively. In univariate analysis, no significant difference in PFS was seen regardless of the age groups or CAR-T type, whereas ECOG PS ≥2, elevated LDH, bulky disease, advanced stage, extranodal involvement, the need for bridging therapy, and prior bendamustine exposure were associated with shorter PFS. These findings support the use of CAR-T in older patients, including those aged ≥80 years. The age at CAR-T therapy did not influence safety, survival, and NRM outcomes. Older patients should not be excluded from receiving CAR-T therapy solely based on their chronological age.

Abstract Introduction Left atrial appendage occlusion (LAAO) can be performed using diverse anesthetic approaches ranging from moderate sedation (MS) to general anesthesia (GA), and guided by intracardiac echocardiography (ICE) or transesophageal echocardiography (TEE). Prior studies have demonstrated shorter time in lab for heart rhythm procedures performed under MS. The objective of this study was to compare laboratory times, acute procedural outcomes and complication rates for LAAO procedures performed using MS and 4‐dimensional ICE as opposed to GA. Methods and Results This was a retrospective observational cohort study of 135 consecutive patients who were referred for LAAO to be performed with either GA or MS between June 2022 and April 2024. The primary endpoints were total laboratory time, procedure time, nonprocedure time, and fluoroscopy time. The secondary endpoints were stroke, peri‐device leak (>5 mm), device‐related left atrial thrombus, cardiovascular mortality, and all‐cause mortality at 45 days and 6 months postprocedure, where data were available. The mean age of patients in the study was 78.8 ± 7.8 years and 64.4% were male with no difference between GA and MS. In the MS group, 4D‐ICE was used for intraprocedural imaging in 95.5% of patients and 2 dimensional‐ICE (2D‐ICE) was used in 4.5% of patients. In the GA group, intra‐procedural imaging was done using TEE in 51.5%, 2D‐ICE in 32.4% and 4D‐ICE in 16.2% of cases. Total laboratory time was significantly lower in the MS group compared to the GA group (68.3 ± 23.1 vs 117.1 ± 34.3 min; p < 0.001), due to shorter nonprocedure time (15.2 ± 9.1 vs 63.7 ± 22.0 min; p < 0.001), with no significant difference in procedure time and fluoroscopy time. There was no significant difference in complications at 45 days and 6 months postprocedure. Conclusion In this single center study, MS reduced total lab time by reducing nonprocedure time when compared to GA for LAAO, without affecting clinical outcomes.

Background: Vascular recovery from catheter ablation (CA) generally requires a period of leg immobilization. Vascular closure devices reduce the length of bedrest and promote earlier discharge, however, a period of immobilization is still routinely observed. The objective of this study was to compare a strategy of immediate leg mobilization (IM) using percutaneous suture-mediated closure devices against figure-of-eight sutures and 4h bed rest (BR) after CA of atrial fibrillation (AF) using large vascular access sheaths for cryoballoon (CBA) and pulsed-field ablation (PFA). Methods: A total of 98 subjects were analyzed (49 IM and 49 BR). Vascular closure in IM consisted of a single percutaneous suture-mediated closure device (Perclose ProStyle) delivered to each of 3 venous access sites in a single groin. Following the procedure, both legs could be mobilized immediately with no head-of-bed restriction. Ambulation was instructed at 1h post-procedure, and discharge was scheduled at 3h. Hemostasis in BR was achieved using figure-of-eight sutures delivered to one or both groins utilized for access, and 4h bedrest. In both groups, one of the sheaths consisted of a 12F to 17F access for CBA or PFA. Protamine was administered prior to the removal of sheaths. Oral anticoagulation was resumed same day. The primary endpoint was the incidence of vascular complications. The secondary endpoint was time to discharge. Results: Baseline characteristics between groups were similar (Age 67.8 ± 13.1 years, BMI 30.2 ± 6.8, LVEF 55.7 ± 12.4, 48% female). 55% of IM and 100% of BR underwent CBA. The remainder underwent PFA. There was no difference in the rate of vascular complications between the two groups (1 IM vs 0 BR, p = 0.315 ). The time to discharge was significantly shorter in the IM group (3.9 ± 0.8 vs 5.4 ± 1.0 h, p < 0.0001 ). Conclusions: In this single-center study, immediate mobilization facilitated by suture-mediated vascular closure following catheter ablation using large access sheaths was associated with no difference in vascular complications compared to bedrest and resulted in earlier discharge. Larger studies evaluating cost, clinical endpoints, and patient-reported outcomes are needed.