Abstract Purpose To investigate the effects of β-ecdysterone on fracture healing and the underlying mechanism. Methods MTT assay was used to detect the cell viability and alkaline phosphatase (ALP) activity was measured using a commercial kit. AO/PI and flow cytometry assays were used to determine the state of apoptosis of osteoblasts. The expression level of RunX2, ATG7 and LC3 was evaluated by qRT-PCR and Western blot assays. X-ray and HE staining were conducted on the fractured femur to evaluate the pathological state. Immunohistochemical assay was used to detect the expression level of Beclin-1 and immunofluorescence assay was used to measure the expression level of LC3 in the fractured femurs. Western blot was utilized to determine the expression level of PI3K, p-AKT1, AKT1, p-mTOR, mTOR, p-p70S6K, and p70S6K. Results The ALP activity and expression of RunX2 in fractured osteoblasts were significantly suppressed by 3-methyladenine and elevated by rapamycin, 60, and 80 μM β-ecdysterone. The apoptotic state of fractured osteoblasts was enhanced by 3-methyladenine and alleviated by rapamycin, 60, and 80 μM β-ecdysterone. The state of autophagy both in fractured osteoblasts and femurs was inhibited by 3-methyladenine and facilitated by rapamycin and β-ecdysterone. Compared to control, Garrett score in 3-methyladenine group was significantly decreased and promoted in rapamycin and β-ecdysterone groups, accompanied by ameliorated pathological state. Lastly, the PI3K/AKT/mTOR pathway both in fractured osteoblasts and femurs was activated by 3-methyladenine and inhibited by rapamycin and β-ecdysterone. Conclusion β-ecdysterone might facilitate fracture healing by activating autophagy through suppressing PI3K/AKT/mTOR signal pathway.

Purpose In this study, we aimed to assess the occurrence of hidden blood loss (HBL) and its associated risk factors in patients with lumbar degenerative diseases who underwent percutaneous endoscopic transforaminal lumbar interbody fusion (Endo-TLIF). Methods Sex, age, height, weight, body mass index, and medical history including hypertension, diabetes, and osteoporosis were recorded. The duration of symptoms, preoperative lumbar subcutaneous fat tissue thickness (measured using midsagittal T2-weighted magnetic resonance imaging), lumbar disc degeneration grade, and other basic patient information were also documented. The levels of fibrinogen, activated partial thromboplastin time, prothrombin time, thrombin time, and platelet count as well as the pre- and postoperative hematocrit and hemoglobin levels were collected. In addition, the number of fusion levels, surgical time, and intraoperative blood loss were recorded. Total blood loss (TBL) was calculated using the gross formula, and HBL was calculated based on the TBL and visible blood loss. The risk factors were analyzed using single-factor correlation and multivariate linear regression analyses. Results Of the 83 patients, there were 42 males and 41 females. Hypertension ( P = 0.003), fusion level ( P < 0.001 ), and surgery time ( P < 0.001 ) were significantly correlated with HBL via a single-factor correlation analysis. Multiple linear regression analysis showed that the fusion level ( P < 0.001 ) and surgery time ( P < 0.001 ) were independent risk factors for HBL. Conclusion In patients with lumbar degenerative diseases treated with Endo-TLIF, HBL accounts for a large proportion of TBL. A large number of fusion segments and prolonged operation time are risk factors for increased perioperative HBL during Endo-TLIF. Increased attention should be paid to the presence of HBL to ensure the safety of perioperative patients.