Bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw (BRONJ) occurs in the jawbone and interfacing oral mucosa of patients treated with bisphosphonates. Herein, we report novel histopathological findings in the oral mucosa of a surgical specimen obtained from a 61-year-old man with BRONJ. The resected jawbone and adjacent oral mucosa were separated for histological examination. The mucosal tissue was examined using Von Kossa staining and immunohistochemical (CK5/6, p63) staining of non-decalcified paraffin sections. Pseudoepitheliomatous hyperplasia (PEH), a microscopic feature of the mucosal epithelium in BRONJ, was observed in soft tissue specimens, concomitant with inflammatory cell infiltration. Von Kossa staining revealed small fragments of necrotic bone, tens to hundreds of micrometers in size, scattered within the connective tissues; the PEH forefront contacted some of the bone fragments. Immunohistochemical staining demonstrated that occasionally, the PEH not only contacted but also encompassed the bone fragments. To our knowledge, this is the first report of presence of micro bone fragments and their association with PEH in the oral mucosa in BRONJ.

The prognostic value of negative regulators of ferroptosis in patients with colorectal cancer (CRC) has not yet been fully elucidated. The present study performed a systematic in silico identification and selection of candidate negative regulators of ferroptosis using The Cancer Genome Atlas data cohort (n=367), followed by clinical validation through immunohistochemistry of samples from patients with CRC (n=166) and further in vitro evaluation. In silico analysis identified specific light‑chain subunit of the cystine/glutamate antiporter, AIFM2, NFE2L2, FTH1, GLS2, glutathione peroxidase 4 (GPX4) and heat shock protein β‑1 (HSPB1) genes as possible candidates. Furthermore, patients with high expression of GPX4 or HSPB1 exhibited significantly worse overall survival (OS) compared with those with low expression (P<0.01 for both). Immunohistochemical analysis revealed that both OS and recurrence‑free survival (RFS) of patients with CRC and high GPX4 or HSPB1 expression were significantly worse compared with in patients with low expression (P<0.01 for all). Furthermore, multivariate analysis showed that high GPX4 and HSPB1 expression were independent risk factors for poor oncological outcome for OS and RFS (GPX4: RFS, P=0.03; HSPB1: OS, P=0.006 and RFS, P<0.0001). Moreover, the effects of GPX4 and HSPB1 small interfering RNAs on two CRC cell lines (DLD‑1 and SW480) indicated that GPX4 and HSPB1 may exhibit important roles in attenuating the cytotoxic effect of 5‑fluorouracil‑based chemotherapy. In conclusion, the current study confirmed that GPX4 and HSPB1 may serve as substantial prognostic‑ and recurrence‑predictive biomarkers in patients with CRC.