The contractile and inflammatory actions of the cysteinyl leukotrienes (CysLTs), LTC(4), LTD(4), and LTE(4), are thought to be mediated through at least two distinct but related CysLT G protein-coupled receptors. The human CysLT(1) receptor has been recently cloned and characterized. We describe here the cloning and characterization of the second cysteinyl leukotriene receptor, CysLT(2), a 346-amino acid protein with 38% amino acid identity to the CysLT(1) receptor. The recombinant human CysLT(2) receptor was expressed in Xenopus oocytes and HEK293T cells and shown to couple to elevation of intracellular calcium when activated by LTC(4), LTD(4), or LTE(4). Analyses of radiolabeled LTD(4) binding to the recombinant CysLT(2) receptor demonstrated high affinity binding and a rank order of potency for competition of LTC(4) = LTD(4) LTE(4). In contrast to the dual CysLT(1)/CysLT(2) antagonist, BAY u9773, the CysLT(1) receptor-selective antagonists MK-571, montelukast (Singulair(TM)), zafirlukast (Accolate(TM)), and pranlukast (Onon(TM)) exhibited low potency in competition for LTD(4) binding and as antagonists of CysLT(2) receptor signaling. CysLT(2) receptor mRNA was detected in lung macrophages and airway smooth muscle, cardiac Purkinje cells, adrenal medulla cells, peripheral blood leukocytes, and brain, and the receptor gene was mapped to chromosome 13q14, a region linked to atopic asthma.

Lysophosphatidic acid (LPA) exerts a variety of biological responses through specific receptors: three subtypes of the EDG-family receptors, LPA₁, LPA₂, and LPA₃ (formerly known as EDG-2, EDG-4, and EDG-7, respectively), and LPA₄/GPR23, structurally distinct from the EDG-family receptors, have so far been identified. In the present study, we characterized the action mechanisms of 3-(4-[4-([1-(2-chlorophenyl)ethoxy]carbonyl amino)-3-methyl-5-isoxazolyl] benzylsulfanyl) propanoic acid (Ki16425) on the EDG-family LPA receptors. Ki16425 inhibited several responses specific to LPA, depending on the cell types, without any appreciable effect on the responses to other related lipid receptor agonists, including sphingosine 1-phosphate. With the cells overexpressing LPA₁, LPA₂, or LPA₃, we examined the selectivity and mode of inhibition by Ki16425 against the LPA-induced actions and compared them with those of dioctyl glycerol pyrophosphate (DGPP 8:0), a recently identified antagonist for LPA receptors. Ki16425 inhibited the LPA-induced response in the decreasing order of LPA₁ ≥ LPA₃ » LPA₂, whereas DGPP 8:0 preferentially inhibited the LPA₃-induced actions. Ki16425 inhibited LPA-induced guanosine 5′-O-(3-thio)triphosphate binding as well as LPA receptor binding to membrane fractions with a same pharmacological specificity as in intact cells. The difference in the inhibition profile of Ki16425 and DGPP 8:0 was exploited for the evaluation of receptor subtypes involved in responses to LPA in A431 cells. Finally, Ki16425 also inhibited LPA-induced long-term responses, including DNA synthesis and cell migration. In conclusion, Ki16425 selectively inhibits LPA receptor-mediated actions, especially through LPA₁ and LPA₃; therefore, it may be useful in evaluating the role of LPA and its receptor subtypes involved in biological actions.

Apoptosis signal-regulating kinase 1 (ASK1) is an upstream signaling molecule in oxidative stress-induced responses.Because oxidative stress is involved in asthma pathogenesis, ASK1 gene deficiency was investigated in animal models of allergic asthma.However, there is no study to investigate whether ASK1 inhibitors could be applied for asthma to date.Selonsertib, a potent and selective ASK1 inhibitor, was applied to BALB/c mice of an ovalbumin (OVA)-induced allergic asthma model.Selonsertib suppressed antigen-induced degranulation of RBL-2H3 mast cells in a concentration-dependent manner.The administration of selonsertib both before OVA sensitization and OVA challenge significantly reduced airway hyperresponsiveness, and suppressed eosinophil numbers and inflammatory cytokine levels in the bronchoalveolar lavage fluid.Histopathologic examination elucidated less inflammatory responses and reduced mucin-producing cells around the peribronchial regions of the lungs.Selonsertib also suppressed the IgE levels in serum and the protein levels of IL-13 in the bronchoalveolar lavage fluid.These results suggest that selonsertib may ameliorate allergic asthma by suppressing immune responses and be applicable to allergic asthma.

Asthma is characterized by chronic inflammation and respiratory tract remodeling.Peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) play important roles in the pathogenesis and regulation of chronic inflammatory processes in asthma.The role of PPARγ has been studied using synthetic PPARγ agonists in patients with asthma.However, involvement of PPARα/δ has not been studied in asthma.In the present study, we investigated if elafibranor, a PPARα/δ dual agonist, can modulate ovalbumin (OVA)-induced allergic asthma, which is a potential drug candidate for non-alcoholic fatty liver in obese patients.Elafibranor suppresses antigeninduced degranulation in RBL-2H3 mast cells without inducing cytotoxicity in vitro.In mice with OVA-induced allergic asthma, the administration of elafibranor suppressed OVA-induced airway hyper-responsiveness at a dose of 10 mg/kg.Elafibranor also suppressed the OVA-induced increase in immune cells and pro-inflammatory cytokine production in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF).Histological studies suggested that elafibranor suppressed OVA-induced lung inflammation and mucin hyper-production in the bronchial airways.In addition, elafibranor suppressed OVA-induced increases in serum immunoglobulin E and IL-13 levels in BALF.Conversely, the present study suggests that elafibranor has the potential for use in patients with allergic asthma.

Dietary supplementation with n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFA) has been found to be beneficial in rodent rheumatoid arthritis models and human trials. However, the molecular targets of n-3 PUFAs and their beneficial effects on rheumatoid arthritis are under-researched. Free fatty acid receptor 4 (FFA4, also known as GPR120) is a receptor for n-3 PUFA. We aim to investigate whether FFA4 activation reduces collagen-induced rheumatoid arthritis (CIA) by using an FFA4 agonist, compound A (CpdA), in combination with DBA-1J Ffa4 gene wild-type (WT) and Ffa4 gene knock-out (KO) mice. CIA induced an increase in the arthritis score, foot edema, synovial hyperplasia, pannus formation, proteoglycan loss, cartilage damage, and bone erosion, whereas the administration of CpdA significantly suppressed those increases in Ffa4 WT mice but not Ffa4 gene KO mice. CIA increased mRNA expression levels of pro-inflammatory Th1/Th17 cytokines, whereas CpdA significantly suppressed those increases in Ffa4 WT mice but not Ffa4 gene KO mice. CIA induced an imbalance between Th1/Th17 and Treg cells, whereas CpdA rebalanced them in spleens from Ffa4 WT mice but not Ffa4 gene KO mice. In SW982 synovial cells, CpdA reduced the LPS-induced increase in pro-inflammatory cytokine levels. In summary, the present results suggest that the activation of FFA4 in immune and synovial cells could suppress the characteristics of rheumatoid arthritis and be an adjuvant therapy.