Abstract Background Immune checkpoint blockade has emerged as a key strategy to the therapy landscape of non‐small cell lung cancer (NSCLC). However, notable differences in immunotherapeutic outcomes exist between the two primary NSCLC subtypes: lung adenocarcinoma (LUAD) and lung squamous cell carcinoma (LUSC). This disparity may stem from the tumor immune microenvironment's heterogeneity at the transcriptome level. Methods By integrative analysis of transcriptomic characterization of 38 NSCLC patients by single‐cell RNA sequencing, the present study revealed a distinct tumor microenvironment (TME) between LUAD and LUSC, with relevant results further confirmed in bulk transcriptomic and multiplex immunofluorescence (mIF) validation cohort of neoadjuvant immunotherapy patients. Results LUAD exhibited a more active immune microenvironment compared to LUSC. This included highly expression of HLA I/II in cancer cells, reinforced antigen presentation potential of dendritic cells and enhanced cytotoxic activity observed in T/NK cells. In LUSC, cancer cells highly expressed genes belonging to the aldo‐keto reductases, glutathione S ‐transferases and aldehyde dehydrogenase family, negatively correlating with immunotherapy outcomes in the validation cohort of our center. Further analysis revealed elevated infiltrated cancer‐associated fibroblasts (CAFs) in LUSC, which was corroborated in The Cancer Genome Atlas cohort. Corresponding increased infiltration of ADH1B+ CAFs in major pathologic response (MPR) patients and the higher presence of FAP+ CAFs in non‐MPR patients were demonstrated by multiplex mIF. Moreover, upregulating immunosuppressive extracellular matrix remodeling was identified in LUSC. Conclusions These comprehensive analyses advance the understanding of the differences in TME between LUAD and LUSC, offering insights for patient selection and developing subtype‐specific treatment strategies.

Reactive oxygen species (ROS) is promising in cancer therapy by accelerating tumor cell death, whose therapeutic efficacy, however, is greatly limited by the hypoxia in the tumor microenvironment (TME) and the antioxidant defense. Amplification of oxidative stress has been successfully employed for tumor therapy, but the interactions between cancer cells and the other factors of TME usually lead to inadequate tumor treatments. To tackle this issue, we develop a pH/redox dual-responsive nanomedicine based on the remodeling of cancer-associated fibroblasts (CAFs) for multi-pronged amplification of ROS (ZnPP@FQOS). It is demonstrated that ROS generated by ZnPP@FQOS is endogenously/exogenously multiply amplified owing to the CAFs remodeling and down-regulation of anti-oxidative stress in cancer cells, ultimately achieving the efficient photodynamic therapy in a female tumor-bearing mouse model. More importantly, ZnPP@FQOS is verified to enable the stimulation of enhanced immune responses and systemic immunity. This strategy remarkably potentiates the efficacy of photodynamic-immunotherapy, thus providing a promising enlightenment for tumor therapy. The therapeutic efficacy of reactive oxygen species (ROS) for cancer therapy is limited by the hypoxia in the tumor microenvironment and the antioxidant defense. Here, the authors address these limitations by developing a tumor microenvironment-responsive hybrid nanomedicine based on cancer associated fibroblasts remodeling for multi-pronged amplification of ROS.