Cell-free circulating tumour DNA (ctDNA) in plasma has been shown to be informative of the genomic alterations present in tumours and has been used to monitor tumour progression and response to treatments. However, patients with brain tumours do not present with or present with low amounts of ctDNA in plasma precluding the genomic characterization of brain cancer through plasma ctDNA. Here we show that ctDNA derived from central nervous system tumours is more abundantly present in the cerebrospinal fluid (CSF) than in plasma. Massively parallel sequencing of CSF ctDNA more comprehensively characterizes the genomic alterations of brain tumours than plasma, allowing the identification of actionable brain tumour somatic mutations. We show that CSF ctDNA levels longitudinally fluctuate in time and follow the changes in brain tumour burden providing biomarkers to monitor brain malignancies. Moreover, CSF ctDNA is shown to facilitate and complement the diagnosis of leptomeningeal carcinomatosis.

Programmed death-ligand 1 (PD-L1) may be induced by oncogenic signals or can be upregulated via interferon gamma (IFN-γ). We have explored whether the expression of IFNG, the gene encoding IFN-γ, is associated with clinical response to the immune checkpoint blockade in non-small cell lung cancer (NSCLC) and melanoma patients. The role of inflammation-associated transcription factors STAT3, IKBKE, STAT1 and other associated genes has also been examined.Total RNA from 17 NSCLC and 21 melanoma patients was analyzed by quantitative reverse transcription PCR. STAT3 and Rantes, YAP1 and CXCL5, DNMT1, RIG1 and TET1, EOMES, IFNG, PD-L1 and CTLA4, IKBKE and NFATC1 mRNA were examined. PD-L1 protein expression in tumor and immune cells and stromal infiltration of CD8+ T-cells were also evaluated. Progression-free survival and overall survival were estimated.A total of 17 NSCLC patients received nivolumab and 21 melanoma patients received pembrolizumab. Progression-free survival with nivolumab was significantly longer in NSCLC patients with high versus low IFNG expression (5.1 months versus 2 months, p = 0.0124). Progression-free survival with pembrolizumab was significantly longer in melanoma patients with high versus low IFNG expression (5.0 months versus 1.9 months, p = 0.0099). Significantly longer overall survival was observed for melanoma patients with high versus low IFNG expression (not reached versus 10.2 months p = 0.0183). There was a trend for longer overall survival for NSCLC patients with high versus low IFNG expression.IFN-γ is an important marker for prediction of response to immune checkpoint blockade. Further research is warranted in order to validate whether IFNG is more accurate than PD-L1.

LBA8511 Background: Fulzerasib (GFH925), a KRAS G12C inhibitor, showed substantial efficacy in previously treated NSCLC patients (pts) as monotherapy. Activation of epidermal growth factor receptor (EGFR) is identified to be one of the dominant mechanisms for KRAS inhibition resistance. Preclinical evidence showed synergistic activity in KRAS G12C mutant NSCLC modeling using fulzerasib in combination with cetuximab. Here we report the first results for a KRAS G12C inhibitor combined with an anti-EGFR antibody in NSCLC pts as front-line treatment. Methods: KROCUS (NCT05756153) was an open-label, single-arm, multi-center, Phase II study with the primary objective to evaluate the efficacy of fulzerasib in combination with cetuximab in pts with previously untreated advanced NSCLC harboring KRAS G12C mutation. Secondary objectives included safety/tolerability, pharmacokinetics and biomarkers. Pts were enrolled to receive fulzerasib (oral, 600 mg BID) and cetuximab (intravenous, 500 mg/m 2 , every two weeks [Q2W]) combination treatment in a 28-day cycle. Results: As of Jan. 30, 2024, a total of 27 pts (median age: 68 yrs old; 55.6% female) were treated, 11 (40.7%) with baseline brain metastases. Of 20 pts who had at least one post-treatment tumor assessment, ORR was 80.0% (95% CI: 56.3, 94.3, including one CR), of whom eight pts had ≥ 50% tumor shrinkages in the target lesions. Disease control rate (DCR) was 100% (95% CI: 83.2, 100.0). Five out of seven pts (71.4%) with brain metastases achieved PRs. Nine pts with baseline PD-L1 expression tested (six TPS≥1% and three TPS <1%) all achieved PRs. The overall safety profile of the combination was favorable. Treatment-related adverse events (TRAEs) of any grade occurred in 21 (77.8%) pts. 5 pts (18.5%) experienced G3 TRAEs and no G4 or 5 TRAEs. Three pts (11.1%) had dose reduction/interruption with fulzerasib due to TRAEs but no pts discontinued treatment while one pt (3.7%) had dose reduction/interruption and three (11.1%) discontinued cetuximab due to TRAEs. Table 1 shows the most common TRAEs or G3 TRAEs. Conclusions: The preliminary data from ongoing KROCUS study has demonstrated very promising efficacy and favorable safety profile of fulzerasib + cetuximab in the first line setting of KRAS G12C mutated NSCLC. More data will be generated to provide clinical evidence supporting this combination as a potential frontline therapy. Clinical trial information: NCT05756153 . [Table: see text]

Abstract Background KRAS- mutant non-small cell lung cancer (NSCLC) shows a relatively low response rate to chemotherapy, immunotherapy and KRAS -G12C selective inhibitors, leading to short median progression-free survival, and overall survival. The MET receptor tyrosine kinase (c- MET ), the cognate receptor of hepatocyte growth factor (HGF), was reported to be overexpressed in KRAS -mutant lung cancer cells leading to tumor-growth in anchorage-independent conditions. Methods Cell viability assay and synergy analysis were carried out in native, sotorasib and trametinib-resistant KRAS -mutant NSCLC cell lines. Colony formation assays and Western blot analysis were also performed. RNA isolation from tumors of KRAS -mutant NSCLC patients was performed and KRAS and MET mRNA expression was determined by real-time RT-qPCR. In vivo studies were conducted in NSCLC (NCI-H358) cell-derived tumor xenograft model. Results Our research has shown promising activity of omeprazole, a V-ATPase-driven proton pump inhibitor with potential anti-cancer properties, in combination with the MET inhibitor tepotinib in KRAS -mutant G12C and non-G12C NSCLC cell lines, as well as in G12C inhibitor (AMG510, sotorasib) and MEK inhibitor (trametinib)-resistant cell lines. Moreover, in a xenograft mouse model, combination of omeprazole plus tepotinib caused tumor growth regression. We observed that the combination of these two drugs downregulates phosphorylation of the glycolytic enzyme enolase 1 (ENO1) and the low-density lipoprotein receptor-related protein (LRP) 5/6 in the H358 KRAS G12C cell line, but not in the H358 sotorasib resistant, indicating that the effect of the combination could be independent of ENO1. In addition, we examined the probability of recurrence-free survival and overall survival in 40 early lung adenocarcinoma patients with KRAS G12C mutation stratified by KRAS and MET mRNA levels. Significant differences were observed in recurrence-free survival according to high levels of KRAS mRNA expression. Hazard ratio (HR) of recurrence-free survival was 7.291 ( p = 0.014) for high levels of KRAS mRNA expression and 3.742 ( p = 0.052) for high MET mRNA expression. Conclusions We posit that the combination of the V-ATPase inhibitor omeprazole plus tepotinib warrants further assessment in KRAS -mutant G12C and non G12C cell lines, including those resistant to the covalent KRAS G12C inhibitors.

Abstract Background Encorafenib plus binimetinib (EB) is a standard of care treatment for advanced BRAFV600-mutant melanoma. We assessed efficacy and safety of encorafenib plus binimetinib in patients with BRAFV600-mutant melanoma and brain metastasis (BM) and explored if radiotherapy improves the duration of response. Methods E-BRAIN/GEM1802 was a prospective, multicenter, single arm, phase II trial that enrolled patients with melanoma BRAFV600-mutant and BM. Patients received encorafenib 450 mg once daily plus binimetinib 45 mg BID, and those who achieved partial response or stable disease at first tumor assessment were offered radiotherapy. Treatment continued until progression. Primary endpoint was intracranial response rate (icRR) after 2 months of EB, establishing a futility threshold of 60%. Results The study included 25 patients with no BM symptoms and 23 patients with BM symptoms regardless of using corticosteroids. Among them, 31 patients (64.6%) received sequential radiotherapy. After two months, icRR was 70.8% (95% CI: 55.9-83.1); 10.4% complete response. Median intracranial PFS and OS were 8.5 (95% CI: 6.4-11.8) and 15.9 (95% CI: 10.7-21.4) months, respectively (8.3 months for icPFS and 13.9 months OS for patients receiving RDT). Most common grade 3-4 treatment-related adverse event was alanine aminotransferase (ALT) increased (10.4%). Conclusion Encorafenib plus binimetinib showed promising clinical benefit in terms of icRR, and tolerable safety profile with low frequency of high grade TRAEs, in patients with BRAFV600-mutant melanoma and BM, including those with symptoms and need for steroids. Sequential radiotherapy is feasible but it does not seem to prolong response.