The Rho guanosine 5′-triphosphatase (GTPase) cycles between the active guanosine triphosphate (GTP)-bound form and the inactive guanosine diphosphate-bound form and regulates cell adhesion and cytokinesis, but how it exerts these actions is unknown. The yeast two-hybrid system was used to clone a complementary DNA for a protein (designated Rhophilin) that specifically bound to GTP-Rho. The Rho-binding domain of this protein has 40 percent identity with a putative regulatory domain of a protein kinase, PKN. PKN itself bound to GTP-Rho and was activated by this binding both in vitro and in vivo. This study indicates that a serine-threonine protein kinase is a Rho effector and presents an amino acid sequence motif for binding to GTP-Rho that may be shared by a family of Rho target proteins.

The balance of programmed death-1 (PD-1)-expressing CD8+ T cells and regulatory T (Treg) cells in the tumor microenvironment (TME) determines the clinical efficacy of PD-1 blockade therapy through the competition of their reactivation. However, factors that determine this balance remain unknown. Here, we show that Treg cells gain higher PD-1 expression than effector T cells in highly glycolytic tumors, including MYC-amplified tumors and liver tumors. Under low-glucose environments via glucose consumption by tumor cells, Treg cells actively absorbed lactic acid (LA) through monocarboxylate transporter 1 (MCT1), promoting NFAT1 translocation into the nucleus, thereby enhancing the expression of PD-1, whereas PD-1 expression by effector T cells was dampened. PD-1 blockade invigorated the PD-1-expressing Treg cells, resulting in treatment failure. We propose that LA in the highly glycolytic TME is an active checkpoint for the function of Treg cells in the TME via upregulation of PD-1 expression.

Using a mouse embryo cDNA library, we conducted a two-hybrid screening to identify new partners for the small GTPase Rho. One clone obtained by this procedure contained a novel cDNA of 291 base pairs and interacted strongly with RhoA and RhoC, weakly with RhoB, and not at all with Rac1 and Cdc42Hs. Full-length cDNAs were then isolated from a mouse brain library. While multiple splicing variants were common, we identified three cDNAs with an identical open reading frame encoding a 61-kDa protein that we named rhotekin (from the Japanese "teki," meaning target). The N-terminal part of rhotekin, encoded by the initial cDNA and produced in bacteria as a glutathione S-transferase fusion protein, exhibited in vitro binding to 35S-labeled guanosine 5'-3-O-(thio)triphosphate-bound Rho, but not to Rac1 or Cdc42Hs in ligand overlay assays. In addition, this peptide inhibited both endogenous and GTPase-activating protein-stimulated Rho GTPase activity. The amino acid sequence of this region shares approximately 30% identity with the Rho-binding domains of rhophilin and a serine/threonine kinase, PKN, two other Rho target proteins that we recently identified (Watanabe, G., Saito, Y., Madaule, P., Ishizaki, T., Fujisawa, K., Morii, N., Mukai, H., Ono, Y., Kakizuka, A., and Narumiya, S. (1996) Science 271, 645-648). Thus, not only is rhotekin a novel partner for Rho, but it also belongs to a wide family of proteins that bear a consensus Rho-binding sequence at the N terminus. To our knowledge, this is the first conserved sequence for Rho effectors, and we have termed this region Rho effector motif class 1.

Lung cancers with epidermal growth factor receptor (EGFR)-activating mutations show good clinical response to gefitinib and erlotinib, selective tyrosine kinase inhibitors (TKI) to EGFR, but these tumors invariably develop drug resistance. Host stromal cells have been found to have a considerable effect on the behavior of cancer cells. Little is known, however, about the role of host cells on the sensitivity of cancer cells to receptor TKIs. We have therefore assessed the effect of crosstalk between stromal cells and lung cancer cells harboring EGFR mutations on susceptibility to EGFR-TKIs.We evaluated the gefitinib sensitivity of lung cancer cells with EGFR-activating mutations, PC-9 and HCC827, when cocultured with fibroblasts and coinjected into severe combined immunodeficient mice. We also examined the effect of lung cancer cells to fibroblast recruitment.Both human fibroblast cell lines and primary cultured fibroblasts produced various levels of hepatocyte growth factor (HGF). Lung cancer cells markedly recruited fibroblasts. The lung cancer cells became resistant to EGFR-TKIs when cocultured in vitro with HGF-producing fibroblasts and coinjected into severe combined immunodeficient mice. Importantly, combined use of gefitinib plus anti-HGF antibody or the HGF antagonist, NK4, successfully overcame the fibroblast-induced EGFR-TKI resistance both in vitro and in vivo. Colocalization of fibroblasts and HGF was detected in both xenograft tumors in mouse model and lung cancer patient specimens.These findings indicate that crosstalk to stromal fibroblasts plays a critical role in lung cancer resistance to EGFR-TKIs and may be an ideal therapeutic target in lung cancer with EGFR-activating mutations.

Objectives We compared the clinical outcomes of mitral valve (MV) repair for mitral regurgitation via robot-assisted approach (ROBO) and small right thoracotomy approach (MINI) three years after the reimbursement of ROBO in Japan. Methods Patients who underwent isolated MV repair by minimally invasive approach between 2018 and 2020 from the Japanese Cardiovascular Surgery Database were included. Patients in the ROBO group were matched to the MINI group based on propensity scores estimated from patient and surgical characteristics. Perioperative outcomes were compared among all as well as in subgroups categorized based on the yearly number of ROBO or MINI cases (≥10 or not) at the hospital. Results We identified 2,443 patients who had undergone isolated MV repair at 250 institutions in the database, and analysis of propensity matched 577 patient-pairs demonstrated that operation time, cardiopulmonary bypass time, and aortic cross clamp time were significantly shorter in ROBO. Although the ICU stay was longer in ROBO, the time to discharge was significantly shorter in ROBO. There was no meaningful difference in in-hospital mortality. The incidence of postoperative stroke, renal failure, prolonged ventilation, and the number of patients who cinverted to MV replacement were similarly low. Procedural time, blood transfusions, explorative procedures for bleeding, postoperative stroke, and prolonged ventilation occurred at a lower rate in the high-volume institutions. Conclusions The study found that ROBO is just as effective as MINI. The introduction of robot-assisted MV repair in Japan has been successful. We compared the clinical outcomes of mitral valve (MV) repair for mitral regurgitation via robot-assisted approach (ROBO) and small right thoracotomy approach (MINI) three years after the reimbursement of ROBO in Japan. Patients who underwent isolated MV repair by minimally invasive approach between 2018 and 2020 from the Japanese Cardiovascular Surgery Database were included. Patients in the ROBO group were matched to the MINI group based on propensity scores estimated from patient and surgical characteristics. Perioperative outcomes were compared among all as well as in subgroups categorized based on the yearly number of ROBO or MINI cases (≥10 or not) at the hospital. We identified 2,443 patients who had undergone isolated MV repair at 250 institutions in the database, and analysis of propensity matched 577 patient-pairs demonstrated that operation time, cardiopulmonary bypass time, and aortic cross clamp time were significantly shorter in ROBO. Although the ICU stay was longer in ROBO, the time to discharge was significantly shorter in ROBO. There was no meaningful difference in in-hospital mortality. The incidence of postoperative stroke, renal failure, prolonged ventilation, and the number of patients who cinverted to MV replacement were similarly low. Procedural time, blood transfusions, explorative procedures for bleeding, postoperative stroke, and prolonged ventilation occurred at a lower rate in the high-volume institutions. The study found that ROBO is just as effective as MINI. The introduction of robot-assisted MV repair in Japan has been successful.

Singlet fission (SF) is a promising approach in quantum information science because it can generate spin-entangled quintet triplet pairs by photoexcitation independent of temperature. However, it is still challenging to rationally achieve quantum coherence at room temperature, which requires precise control of the orientation and dynamics of triplet pairs. Here we show that the quantum coherence of quintet multiexcitons can be achieved at room temperature by arranging two pentacene chromophores in parallel and in close proximity within a macrocycle. By making dynamic covalent Schiff-base bonds between aldehyde-modified pentacene derivatives, macrocyclic parallel dimer-1 (

Ion-conductive 2D nanostructured liquid crystals containing linear carbonate moieties are developed. The complexes of these materials with lithium salts may have potential as self-assembled electrolytes in lithium-ion batteries.