Bacteria can be programmed to deliver natural materials with defined biological and mechanical properties for controlling cell growth and differentiation. Here, we present an elastic, resilient and bioactive polysaccharide derived from the extracellular matrix of Pantoea sp. BCCS 001. Specifically, it was methacrylated to generate a new photo crosslinkable hydrogel that we coined Pantoan Methacrylate or put simply PAMA. We have used it for the first time as a tissue engineering hydrogel to treat VML injuries in rats. The crosslinked PAMA hydrogel was super elastic with a recovery nearing 100 %, while mimicking the mechanical stiffness of native muscle. After inclusion of thiolated gelatin via a Michaelis reaction with acrylate groups on PAMA we could also guide muscle progenitor cells into fused and aligned tubes – something reminiscent of mature muscle cells. These results were complemented by sarcomeric alpha-actinin immunostaining studies. Importantly, the implanted hydrogels exhibited almost 2-fold more muscle formation and 50 % less fibrous tissue formation compared to untreated rat groups. In vivo inflammation and toxicity assays likewise gave rise to positive results confirming the biocompatibility of this new biomaterial system. Overall, our results demonstrate that programmable polysaccharides derived from bacteria can be used to further advance the field of tissue engineering. In greater detail, they could in the foreseeable future be used in practical therapies against VML.

Macroautophagy/autophagy, a crucial cellular process, is typically measured using fluorescence-based techniques, which can be costly, complex, and impractical for clinical settings. In this paper, we introduce a novel, cost-effective, non-fluorescent immunohistochemistry (IHC) method for evaluating autophagy flux. This technique, based on antigen-antibody reactions and chromogenic detection, provides clear, quantifiable results under standard light microscopy, eliminating the need for expensive equipment and specialized reagents. Our method simplifies technical requirements, making it accessible to routine clinical laboratories and research settings with limited resources. By comparing our approach with traditional fluorescence methods, we demonstrate its superior effectiveness, cost-efficiency, and applicability to patient samples. This innovative technique has the potential to significantly advance autophagy research and improve clinical diagnostics, offering a practical and robust tool for studying autophagy mechanisms in diseases such as cancer and neurodegenerative disorders. Our non-fluorescent IHC method represents a significant step forward in evaluating autophagy flux, making it more accessible and reliable, with the promise of enhancing our understanding and treatment of autophagy-related diseases.

Abstract Chimeric antigen receptor (CAR)-T cell adoptive immunotherapy is a promising cancer treatment that uses genetically engineered T cells to attack tumors. However, this therapy can have some adverse effects. CAR-T cell-derived exosomes are a potential alternative to CAR-T cells that may overcome some limitations. Exosomes are small vesicles released by cells and can carry a variety of molecules, including proteins, RNA, and DNA. They play an important role in intercellular communication and can be used to deliver therapeutic agents to cancer cells. The application of CAR-T cell-derived exosomes could make CAR-T cell therapy more clinically controllable and effective. Exosomes are cell-free, which means that they are less likely to cause adverse reactions than CAR-T cells. The combination of CAR-T cells and exosomes may be a more effective way to treat cancer than either therapy alone. Exosomes can deliver therapeutic agents to cancer cells where CAR-T cells cannot reach. The appropriate application of both cellular and exosomal platforms could make CAR-T cell therapy a more practicable treatment for cancer. This combination therapy could offer a safe and effective way to treat a variety of cancers.

Trinitroglycerin (TNG) with remarkable angiogenic, antibacterial, and antioxidative activity is a promising candidate to govern wound healing capacity. However, its clinical administration is limited due to associated complications and NO short half-life. In the current study, TNG-loaded chitosan nanogels (TNG-Ngs) were examined in-vitro and in-vivo to gain insight into their clinical application. We prepared TNG-Ngs and characterized their physiochemical properties. The potential of TNG-Ngs was assessed using biocompatibility, scratch assay, and a full-thickness skin wounds model, followed by histopathological and immunohistochemistry examinations. TNG-Ngs particle size 96 ± 18 and definite size distribution histogram. The loading capacity (LC) and encapsulation efficiency (EE) of prepared TNG-Ngs were 70.2 % and 2.1 %, respectively. The TNG-Ngs samples showed enhanced migration of HUVECs with no apparent cytotoxicity. The topical use of TNG-Ngs

Gene therapy, a groundbreaking method for addressing genetic mutations, includes strategies such as gene repair, replacement, inactivation, or the introduction of therapeutic genes, circumventing traditional surgical or pharmacological approaches. Delivery through viral or non-viral vectors presents trade-offs in efficiency and immune response. Recent gene-editing technologies like ZFNs, TALENs, and CRISPR facilitate precise genome modifications by inducing targeted double-strand breaks, with CRISPR/Cas9 recognized for its versatility. Muscular dystrophies, marked by progressive muscle degeneration due to genetic mutations, are a significant focus for gene therapy. While a definitive cure remains elusive, gene therapy provides hope, with ongoing research investigating tailored approaches for various types of muscular dystrophy. This review highlights gene therapy's potential in treating muscular dystrophies, concentrating on the diverse strategies under exploration and contributing to the quest for effective therapeutic interventions and, potentially, cures for these debilitating conditions.

Introduction: Renal dysfunction due to ischemia–reperfusion injury (IRI) is a common problem after kidney transplantation. In recent years, studies on animal models have shown that exosomes derived from mesenchymal stem cells (MSC‐Exo) play an important role in treating acute kidney injury (AKI) and promoting tissue repair. The microneedle patch provides a noninvasive and targeted delivery system for exosomes. The purpose of this innovative approach is to combine MSC‐Exo with microneedle patches. Method: Exosomes were isolated from MSCs, characterized, and placed in the prepared microneedle patch. Then this construct was applied to the IRI mice model. After 7 days, the gene expression of miR‐34a and its targets B‐cell lymphoma‐2 (BCL‐2) and BCL‐2‐associated X (BAX), along with reactive oxygen species (ROS) and lipid peroxidation (LPO) production, was investigated. Additionally, renoprotection was evaluated for measuring blood urea nitrogen (BUN) and creatinine (Cr) and histopathology detection. Results: After using microneedle patches containing exosomes, the reduction of miR‐34a and BAX and enhancement of BCL‐2 were observed. Moreover, treatment by this construct decreased the production of ROS, LPO, BUN, and Cr and improved tissue damage. Conclusion: The use of a microneedle patch containing exosomes is a noninvasive method that enables the release of exosomes in a slow manner. In comparison to exosome injection alone, microneedle patch‐exosome treatment offers a longer and more targeted effect that improves renal IRI dysfunction and reduces tissue damage, potentially facilitating the clinical application of exosomes and improving graft survival.

Mesenchymal stem cell (MSC) therapy has ameliorative effects for treating knee osteoarthritis (KOA) disease. Moreover, there is a growing interest in using MSCs-derived secretome (Sec) containing trophic factors secreted by MSCs for KOA treatment. Recently, some studies have suggested that the combination of MSCs and Sec has the potential to treat the diseases.

Abstract In this in vitro study, for the first time, we evaluate the effects of simvastatin‐loaded liposome nanoparticles (SIM‐LipoNPs) treatment on fibrosis‐induced liver microtissues, as simvastatin (SIM) has shown potential benefits in the non‐alcoholic fatty liver disease process. We developed multicellular liver microtissues composed of hepatic stellate cells, hepatoblastoma cells and human umbilical vein endothelial cells. The microtissues were supplemented with a combination of palmitic acid and oleic acid to develop fibrosis models. Subsequently, various groups of microtissues were exposed to SIM and SIM‐LipoNPs at doses of 5 and 10 mg/mL. The effectiveness of the treatments was evaluated by analysing cell viability, production of reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO), the expression of Kruppel‐like factor (KLF) 2, and pro‐inflammatory cytokines (interleukin(IL)‐1 α, IL‐1 β, IL‐6 and tumour necrosis factor‐α), and the expression of collagen I. Our results indicated that SIM‐LipoNPs application showed promising results. SIM‐LipoNPs effectively amplified the SIM‐klf2‐NO pathway at a lower dosage compatible with a high dosage of free SIM, which also led to reduced oxidative stress by decreasing ROS levels. SIM‐LipoNPs administration also resulted in a significant reduction in pro‐inflammatory cytokines and Collagen I mRNA levels, as a marker of fibrosis. In conclusion, our study highlights the considerable therapeutic potential of using SIM‐LipoNPs to prevent liver fibrosis progress, underscoring the remarkable properties of SIM‐LipoNPs in activating the KLF2‐NO pathway and anti‐oxidative and anti‐inflammatory response.