We report the interaction between a human centromere antigen and an alphoid DNA, a human centromeric satellite DNA, which consists of 170-bp repeating units. A cloned alphoid DNA fragment incubated with a HeLa cell nuclear extract is selectively immunoprecipitated by the anticentromere sera from scleroderma patients. Immunoprecipitation of the DNA made by primer extension defines the 17-bp segment on the alphoid DNA that is required for formation of DNA-antigen complex. On the other hand, when proteins bound to the biotinylated alphoid DNA carrying the 17-bp motif are recovered by streptavidin agarose and immunoblotted, the 80-kD centromere antigen (CENP-B) is detected. DNA binding experiments for proteins immunoprecipitated with anticentromere serum, separated by gel electrophoresis, and transferred to a membrane strongly suggest that the 80-kD antigen specifically binds to the DNA fragment with the 17-bp motif. The 17-bp motif is termed the "CENP-B box." Alphoid monomers with the CENP-B box are found in all the known alphoid subclasses, with varying frequencies, except the one derived from the Y chromosome so far cloned. These results imply that the interaction of the 80-kD centromere antigen with the CENP-B box in the alphoid repeats may play some crucial role in the formation of specified structure and/or function of human centromere.

A cDNA encoding a novel member of the mitogen-activated protein kinase kinase (MAPKK) family, MAPKK6, was isolated and found to encode a protein of 334 amino acids, with a calculated molecular mass of 37 kDa that is 79% identical to MKK3. MAPKK6 was shown to phosphorylate and specifically activate the p38/MPK2 subgroup of the mitogen-activated protein kinase superfamily and could be demonstrated to be phosphorylated and activated in vitro by TAK1, a recently identified MAPKK kinase. MKK3 was also shown to be a good substrate for TAK1 in vitro. Furthermore, when co-expressed with TAK1 in cells in culture, both MAPKK6 and MKK3 were strongly activated. In addition, co-expression of TAK1 and p38/MPK2 in cells resulted in activation of p38/MPK2. These results indicate the existence of a novel kinase cascade consisting of TAK1, MAPKK6/MKK3, and p38/MPK2. A cDNA encoding a novel member of the mitogen-activated protein kinase kinase (MAPKK) family, MAPKK6, was isolated and found to encode a protein of 334 amino acids, with a calculated molecular mass of 37 kDa that is 79% identical to MKK3. MAPKK6 was shown to phosphorylate and specifically activate the p38/MPK2 subgroup of the mitogen-activated protein kinase superfamily and could be demonstrated to be phosphorylated and activated in vitro by TAK1, a recently identified MAPKK kinase. MKK3 was also shown to be a good substrate for TAK1 in vitro. Furthermore, when co-expressed with TAK1 in cells in culture, both MAPKK6 and MKK3 were strongly activated. In addition, co-expression of TAK1 and p38/MPK2 in cells resulted in activation of p38/MPK2. These results indicate the existence of a novel kinase cascade consisting of TAK1, MAPKK6/MKK3, and p38/MPK2.

Objective

 To clarify the association of clinical and prognostic features with dermatomyositis (DM)-specific autoantibodies (Abs) in adult Japanese patients with DM. 

Design

 Retrospective study. 

Setting

 Kanazawa University Graduate School of Medical Science Department of Dermatology and collaborating medical centers. 

Patients

 A total of 376 consecutive adult Japanese patients with DM who visited our hospital or collaborating medical centers between 2003 and 2008. 

Main Outcome Measures

 Clinical and laboratory characteristics of adult Japanese patients with DM and DM-specific Abs that include Abs against Mi-2, 155/140, and CADM-140. 

Results

 In patients with DM, anti–Mi-2, anti–155/140, and anti–CADM-140 were detected in 9 (2%), 25 (7%), and 43 (11%), respectively. These DM-specific Abs were mutually exclusive and were detected in none of 34 patients with polymyositis, 326 with systemic sclerosis, and 97 with systemic lupus erythematosus. Anti–Mi-2 was associated with classical DM without interstitial lung disease or malignancy, whereas anti–155/140 was associated with malignancy. Patients with anti–CADM-140 frequently had clinically amyopathic DM and rapidly progressive interstitial lung disease. Cumulative survival rates were more favorable in patients with anti–Mi-2 compared with those with anti–155/140 or anti–CADM-140 (P < .01 for both comparisons). Nearly all deaths occurred within 1 year after diagnosis in patients with anti–CADM-140. 

Conclusion

 Dermatomyositis-specific Abs define clinically distinct subsets and are useful for predicting clinical outcomes in patients with DM.

Myositis-specific autoantibodies are useful for diagnosing PM/DM. Recently, two new myositis-specific autoantibodies against melanoma differentiation-associated gene 5 (MDA5) and transcriptional intermediary factor 1-gamma (TIF1-gamma) were identified in DM. Here, we detected these autoantibodies in patient sera using new assays with recombinant MDA5 and TIF1-gamma, and associated clinical features with the presence of anti-MDA5 or anti-TIF1-gamma antibodies.We screened 135 Japanese patients with various CTDs, including 82 with DM. DM patients were classified as clinically amyopathic DM (CADM), cancer-associated DM or classical DM without cancer. Anti-MDA5 and anti-TIF1-gamma antibodies were detected by their ability to immunoprecipitate biotinylated recombinant proteins.Sera from 21 (26%) of 82 DM patients immunoprecipitated MDA5, and every anti-MDA5-positive patient had DM (except one patient with SSc). Sera from 20 (65%) of 31 CADM patients reacted with MDA5. Notably, anti-MDA5-positive DM patients had significantly more interstitial lung disease than anti-MDA5-negative DM patients (95 vs 32%, P < 0.001). Sera from 12 (15%) of 82 DM patients immunoprecipitated TIF1-gamma, and anti-TIF1-gamma antibodies were only detected in DM patients. Strikingly, 7 (58%) of 12 patients with cancer-associated DM had sera that reacted with TIF1-gamma. Anti-TIF1-gamma-positive DM patients had significantly more internal malignancies than anti-TIF1-gamma-negative DM patients (58 vs 9%, P < 0.001).Anti-MDA5 and anti-TIF1-gamma antibodies were confirmed to be serological DM subset markers. Anti-MDA5 and anti-TIF1-gamma antibodies were detected based on their ability to immunoprecipitate biotinylated recombinant MDA5 and TIF1-gamma, and were closely associated with life-threatening complications in DM.

We report a case of multiple subcutaneous haemangiomas in a patient with antiphospholipid syndrome accompanied by severe pulmonary embolism. The haemangiomas were considered to be reactive owing to the presence of thrombi, and they had increased in number over the years. We report a rare instance of multiple reactive angioendotheliomatosis nodules developing solely in the subcutaneous tissue and in the absence of superficial symptoms, which has not been previously reported.