Anti-CD20 antibody immunotherapy effectively treats non-Hodgkin's lymphoma and autoimmune disease. However, the cellular and molecular pathways for B cell depletion remain undefined because human mechanistic studies are limited. Proposed mechanisms include antibody-, effector cell–, and complement-dependent cytotoxicity, the disruption of CD20 signaling pathways, and the induction of apoptosis. To identify the mechanisms for B cell depletion in vivo, a new mouse model for anti-CD20 immunotherapy was developed using a panel of twelve mouse anti–mouse CD20 monoclonal antibodies representing all four immunoglobulin G isotypes. Anti-CD20 antibodies rapidly depleted the vast majority of circulating and tissue B cells in an isotype-restricted manner that was completely dependent on effector cell Fc receptor expression. B cell depletion used both FcγRI- and FcγRIII-dependent pathways, whereas B cells were not eliminated in FcR common γ chain–deficient mice. Monocytes were the dominant effector cells for B cell depletion, with no demonstrable role for T or natural killer cells. Although most anti-CD20 antibodies activated complement in vitro, B cell depletion was completely effective in mice with genetic deficiencies in C3, C4, or C1q complement components. That the innate monocyte network depletes B cells through FcγR-dependent pathways during anti-CD20 immunotherapy has important clinical implications for anti-CD20 and other antibody-based therapies.

The effect of the Epstein-Barr virus (EBV) latent membrane protein 1 (LMP1) on the activation and differentiation of normal B cells was investigated. B cells of transgenic mice expressing LMP1 under the control of immunoglobulin promoter/enhancer displayed enhanced expression of activation antigens and spontaneously proliferated and produced antibody. Humoral immune responses of LMP1 transgenic mice in CD40-deficient or normal backgrounds revealed that LMP1 mimics CD40 signals to induce extrafollicular B cell differentiation but, unlike CD40, blocks germinal center formation. Thus, these specific properties of LMP1 may determine the site of primary B cell infection and the state of infection in the natural course of EBV infection, whereas subsequent loss of LMP1 expression may affect the site of persistent latent infection.

Abstract CD20 mAb-mediated B cell depletion is an effective treatment for B cell malignancies and some autoimmune diseases. However, the full effects of B cell depletion on natural, primary, and secondary Ab responses and the maintenance of Ag-specific serum Ig levels are largely unknown. The relationship between memory B cells, long-lived plasma cells, and long-lived humoral immunity also remains controversial. To address the roles of B cell subsets in the longevity of humoral responses, mature B cells were depleted in mice using CD20 mAb. Peritoneal B cell depletion reduced natural and Ag-induced IgM responses. Otherwise, CD20+ B cell depletion prevented humoral immune responses and class switching and depleted existing and adoptively transferred B cell memory. Nonetheless, B cell depletion did not affect serum Ig levels, Ag-specific Ab titers, or bone marrow Ab-secreting plasma cell numbers. Coblockade of LFA-1 and VLA-4 adhesion molecules temporarily depleted long-lived plasma cells from the bone marrow. CD20+ B cell depletion plus LFA-1/VLA-4 mAb treatment significantly prolonged Ag-specific plasma cell depletion from the bone marrow, with a significant decrease in Ag-specific serum IgG. Collectively, these results support previous claims that bone marrow plasma cells are intrinsically long-lived. Furthermore, these studies now demonstrate that mature and memory B cells are not required for maintaining bone marrow plasma cell numbers, but are required for repopulation of plasma cell-deficient bone marrow. Thereby, depleting mature and memory B cells does not have a dramatic negative effect on preexisting Ab levels.

Abstract Purpose: Examination of somatic epidermal growth factor receptor (EGFR) mutations is now a diagnostic routine for treatment of cancer using EGFR tyrosine kinase inhibitors (EGFR-TKI). Circulating tumor DNA is a promising target for noninvasive diagnostics. We evaluated its utility by quantitatively detecting activating and resistant mutations, which were measured with BEAMing (beads, emulsion, amplification, and magnetics). Experimental Design: Twenty-three patients with lung cancer with progressive disease after EGFR-TKI treatment and 21 patients who had never been treated with EGFR-TKIs were studied. Their primary tumors were confirmed to have activating mutations. In the plasma DNA of each patient, the activating mutation found in the corresponding primary tumor and the T790M resistance mutation were quantified by BEAMing. Results: In 32 of 44 patients, activating mutations were detected in the plasma DNA [72.7%; 95% confidence interval (CI), 58.0%–83.6%]. The T790M mutation was detected in 10 of 23 patients in the first group (43.5%; 95% CI, 25.6%–53.4%). The ratio of T790M to activating mutations ranged from 13.3% to 94.0%. The peak of the distribution of the mutation allele fraction in the plasma DNA was in the 0.1% to 1% range. Conclusions: The major advantage of BEAMing is its ability to calculate the fraction of T790M-positive alleles from the alleles with activating mutations. This feature enables the detection of increases and decreases in the number of T790M mutations in cancer cells, regardless of normal cell DNA contamination, which may be useful for monitoring disease progression. Circulating tumor DNA could potentially be used as an alternative method for EGFR mutation detection. Clin Cancer Res; 17(24); 7808–15. ©2011 AACR.

Abstract Background The Japanese National Clinical Database (NCD) is a large‐scale, nationwide, web‐based data entry system that covers the majority of surgical cases performed in Japan. An NCD specializing in urological surgery was launched based on the NCD system in 2018. Methods All urological surgeries performed at more than 1000 institutions were registered from 2018. We herein report the number of surgeries conducted as stipulated in the “Certified Urology Surgeon Training Curriculum” between April 2018 and December 2021. Results A total of 1 377 677 cases were registered from 1185 facilities nationwide under the initiative of the Japanese Urological Association. We examined the number of procedures performed every year for each of the 10 categories. Conclusions The NCD system sustainably provides important information relating to the preoperative status, operational outcome, and best practice for urological surgery in Japan.

A 74-year-old man visited the urology clinic with the chief complaint of urinary retention in December 2014. Serum level of initial prostate specific antigen (PSA) was 50 ng/ml and he was diagnosed with Gleason Score 4＋4 prostate adenocarcinoma with regional lymphadenopathy (cT3aN1M0). PSA level had declined after the treatment with combined androgen blockade. In November 2018, he was diagnosed with castration resistant prostate cancer (CRPC) as local progression was detected by computed tomography (CT) while PSA level did not increase. Since local symptoms worsened, resulting in repeated hematuria after the treatment with enzalutamide, palliative radiation therapy to the prostate (45 Gy) was performed. Five months later, follow-up CT showed multiple metastasis in bilateral lung and left testicle. Serum level of neuron-specific enolase (NSE) was 24.4 ng/ml without an elevated in serum PSA level. He received rebiopsy of the prostate, but no malignant findings were observed. Consequently, bilateral orchiectomy was performed for diagnosis of left testicular tumor. Pathological examination revealed metastasis of neuroendocrine prostate cancer (NEPC). Chemotherapy using cisplatin and irinotecan was administered after orchiectomy. Complete response of lung lesions was achieved and serum level of NSE decreased within normal range. No recurrence has been confirmed for 4 years after the completion of chemotherapy.