Platelet-rich plasma (PRP) is nowadays widely applied in different clinical scenarios, such as orthopedics, ophthalmology and healing therapies, as a growth factor pool for improving tissue regeneration. Studies into its clinical efficiency are not conclusive and one of the main reasons for this is that different PRP preparations are used, eliciting different responses that cannot be compared. Platelet quantification and the growth factor content definition must be defined in order to understand molecular mechanisms behind PRP regenerative strength. Standardization of PRP preparations is thus urgently needed. PRP was prepared by centrifugation varying the relative centrifugal force, temperature, and time. Having quantified platelet recovery and yield, the two-step procedure that rendered the highest output was chosen and further analyzed. Cytokine content was determined in different fractions obtained throughout the whole centrifugation procedure. Our method showed reproducibility when applied to different blood donors. We recovered 46.9 to 69.5% of total initial platelets and the procedure resulted in a 5.4-fold to 7.3-fold increase in platelet concentration (1.4 × 106 to 1.9 × 106 platelets/μl). Platelets were highly purified, because only <0.3% from the initial red blood cells and leukocytes was present in the final PRP preparation. We also quantified growth factors, cytokines and chemokines secreted by the concentrated platelets after activation with calcium and calcium/thrombin. High concentrations of platelet-derived growth factor, endothelial growth factor and transforming growth factor (TGF) were secreted, together with the anti-inflammatory and proinflammatory cytokines interleukin (IL)-4, IL-8, IL-13, IL-17, tumor necrosis factor (TNF)-α and interferon (IFN)-α. No cytokines were secreted before platelet activation. TGF-β3 and IFNγ were not detected in any studied fraction. Clots obtained after platelet coagulation retained a high concentration of several growth factors, including platelet-derived growth factor and TGF. Our study resulted in a consistent PRP preparation method that yielded a cytokine and growth factor pool from different donors with high reproducibility. These findings support the use of PRP in therapies aiming for tissue regeneration, and its content characterization will allow us to understand and improve the clinical outcomes.

Different mesenchymal stromal cells (MSC) have been successfully isolated and expanded in vitro and nowadays they are tested in clinical trials for a wide variety of diseases. Whether all MSC express the same cell surface markers or have a similar secretion profile is still controversial, making it difficult to decide which stromal cell may be better for a particular application.We isolated human mesenchymal stromal cells from bone marrow (BM), adipose tissue (AT) and Wharton's jelly (WJ) and cultured them in fetal bovine serum supplemented media. We evaluated proliferation, in vitro differentiation (osteogenic, adipogenic and chondrogenic potential), expression of cell surface markers and protein secretion using Luminex and ELISA assays.Cell proliferation was higher for WJ-MSC, followed by AT-MSC. Differences in surface expression markers were observed only for CD54 and CD146. WJ-MSC secreted higher concentrations of chemokines, pro-inflammatory proteins and growth factors. AT-MSC showed a better pro-angiogenic profile and secreted higher amounts of extracellular matrix components and metalloproteinases.Mesenchymal stromal cells purified from different tissues have different angiogenic, inflammatory and matrix remodeling potential properties. These abilities should be further characterized in order to choose the best protocols for their therapeutic use.

Schematic of reconstructed epidermis model, with and without nanoparticle exposure.

Introduction Periodontitis, affecting approximately 3.9 billion individuals globally, significantly impacts quality of life and has raised interest in its potential systemic effects. Sodium perborate, a common component in oral care products for biofilm control, is widely used, though concerns about its safety persist. This study aimed to evaluate the in vitro toxicity of six commercial oral care products and varying concentrations of sodium perborate, utilizing human gingival fibroblasts (HGF) and keratinocytes (HaCat) as cell models. Methods Experiments were performed in both 2D monolayer and 3D cultures using MTT and electrical impedance assays, adhering to the manufacturer’s recommended exposure time of 30–60 s for product testing. For the reconstructed epidermis model, a prolonged exposure time of 42 min was applied, following the Organization for Economic Cooperation and Development (OECD) Test Guideline 439. Results Results indicated that all products and sodium perborate at 1 mg/mL were cytotoxic in monolayer cultures. However, at concentrations relevant to commercial formulations (0.06 mg/mL sodium perborate), no significant toxicity was observed. In contrast, the 3D culture models, including spheroids and reconstructed epidermis, exhibited minimal to no cytotoxic effects for the commercial products, with sodium perborate showing no significant toxicity below 0.1 mg/mL. The reconstructed epidermis model, used as surrogate for oral mucosa, further confirmed that the products were non-irritating, in compliance with OECD TG 439 standards. Discussion This study highlights the importance of considering exposure time, dosage, and cellular model when assessing the safety of oral care products. While 2D models are useful for preliminary screenings, 3D models provide a more physiologically relevant assessment, emphasizing the need for robust testing protocols to ensure product safety.

Dental implants are essential for the prosthetic rehabilitation of edentulous patients, requiring adequate bone volume and density for osseointegration and load support. The posterior region of the maxilla, commonly deficient in bone quality and quantity, represents a clinical challenge. This case series reports an analysis involving 69 dental implants in the atrophic maxilla of nine patients. The procedures adopted combined alloplastic hydroxyapatite grafting and leukocyte platelet-rich fibrin (L-PRF) applied to the alveolar ridge and maxillary sinus lift. With an average follow up of three years after the installation of the prostheses, an implant success rate of 98.5% was observed, showing integration and functional stability. The strategy of combining hydroxyapatite with L-PRF proved to be effective in increasing bone volume and promoting osseointegration. These findings indicate that the technique and biomaterials are viable for rehabilitating atrophic maxillae in the posterior region, offering long-lasting clinical results and a high success rate.

Objetivo: O objetivo do presente estudo é avaliar a precisão do posicionamento de implantes com dois diferentes sistemas guiados (kits de fresagens e instalação- com e sem guia de brocas) em densidades ósseas medular e cortical. Materiais e Métodos: Foram utilizados 40 implantes de junção protética cônica e 20 blocos de poliuretano de dupla densidade 40PFC e 10PFC, simulando osso medular e cortical respectivamente, divididos em quatro grupos (Grupo 1- Sistema 1 com guia de brocas/Medular; Grupo 2- Sistema 1 com guia de brocas/Cortical; Grupo 3- Sistema 2 sem guia de brocas/Medular; Grupo 4- Sistema 2 sem guia de brocas/Cortical). Os blocos foram escaneados e tomografados para planejamento digital. Os implantes foram posicionados através e planejamento digital em cada centro da densidade, ou seja, dois implantes por bloco e cada um dos implantes foi posicionado com 17o de inclinação. Foram realizadas duas guias cirúrgicas diferentes para cada kit de instrumentação. Após a fresagem e instalação dos implantes, foi instalado o scanbody nos implantes e os blocos foram escaneados novamente. A imagem 3D e o arquivo STL gerado de cada bloco, foi sobreposta ao planejamento virtual inicial e o desvio coronal, axial e angular foi calculado no software para cada implante. Resultados: Comparando os 4 grupos houve diferença estatística entre os grupos para a variável desvio angular (p=0,002) e desvio axial (p=0,001). Ao avaliar as comparações múltiplas entre os grupos nas variantes significativas, a comparação que apresentaram p<0,05 foram Grupo 1 x Grupo 4; e Grupo 3 x Grupo 4. Comparando os dois kits de instrumentais – COM e SEM Guia de brocas (medular e cortical), notamos que, não houve diferença significativa estatisticamente em nenhuma das variáveis (p >0,05). Na análise descritiva das variáveis separadas pelos grupos: Cortical (kit COM guia de Brocas e SEM guia de brocas), e Medular (kit COM guia de Brocas e SEM guia de brocas) o desvio em osso cortical foi significativamente maior do que o medular. Conclusão: A acurácia de instalação dos implantes com junção protética Morse não foi afetada pelos dois diferentes tipos de sistema de instrumentação guiado utilizado em ambas as densidades ósseas. Os implantes guiados instalados em osso cortical apresentaram um maior desvio perante os instalados em osso medular.