Staphylococcus aureus (S. aureus) is a kind of gram-positive bacteria, and its virulence factors can cause many kinds of infections. Traditional antibiotics can not only kill bacteria, but also easily lead to bacterial resistance. Jingfang Mixture (JFM) is commonly used in clinic to prevent and treat epidemic diseases and infectious diseases. The main purpose of this study is to explore the inhibitory effect of JFM on alpha-hemolysin (Hla) of S. aureus and to alleviate the damage caused by Hla. We found that JFM could inhibit the hemolytic activity, gene and protein level and neutralizing activity of Hla in a dose-dependent manner at the concentrations of 125, 250 and 500 μg/mL, without affecting the growth of bacteria. In addition, JFM reduced the damage of Hla to A549 cells and the release of lactate dehydrogenase (LDH). We also observed that in the S. aureus - induced pneumonia mouse model, JFM could significantly prolong the life of mice, reduce the bacterial load in the lungs, significantly improve the pathological state of the lungs and alleviate the damage caused by inflammatory factors, and the pathogenicity of gene deletion strain DU 1090 of S. aureus to pneumonia mice was also significantly reduced. In conclusion, this study proved that JFM is a potential drug against S. aureus infection, and this study provided a preliminary study for better guidance of clinical drug use.

This study aims to investigate the mechanism of Mailuo Shutong Pills(MLST) on posterior limb muscle swelling caused by femoral fracture(SCFF) through network pharmacology and animal experiments. The plasma components of MLST were analyzed by LC-MS, and the target and signal pathway of SCFF were predicted by network pharmacology and verified by molecular docking. SCFF model rats were established through animal experiments, and different doses of MLST were administered to detect the degree of limb swelling. Hematoxylin-eosin(HE) staining was used to observe pathological changes in muscle tissue, and interleukin-6(IL-6), interleukin-1β(interleukin-1β), and tumor necrosis factor-α(TNF-α) in peripheral blood were determined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). The expression of relevant signaling pathways was measured by Western blot. Network pharmacological results showed that MLST and SCFF had a total of 153 disease targets, and the key targets were IL-6, TNF, etc., involving mitogen-activated protein kinase(MAPK) signaling pathway, phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K)/protein kinase B(AKT) signaling pathway, etc. The binding energies of the main components and key targets were lower than-7.0 kcal·mol~(-1), indicating that the network analysis results were reliable. The results of animal experiments showed that MLST could reduce the swelling degree and pathological damage of the posterior limb muscles of SCFF rats compared with the model group. ELISA results showed that MLST could reduce the levels of IL-6, IL-1β, and TNF-α in the serum of SCFF rats. Western blot results showed that MLST can reduce the expression of p-AKT, p-PI3K, p-NF-κB, p-p38 MAPK, and p-ERK in SCFF rats. MLST may reduce the content of inflammatory factors in serum by regulating the expression of PI3K/AKT and MAPK-related signaling pathway protein and improving posterior limb muscle SCFF in rats.

This study aims to elucidate the therapeutic effect and mechanism of Jingfang Granules on acute lung injury, and to investigate the regulatory effect of Jingfang Granules on the metabolic disorders of endogenous metabolites in feces and the homeostasis of intestinal microbiota in acute lung injury, mice were randomly divided into a sham group, a model group, and a Jingfang Granules group. After modeling, the mice were continuously administered for 6 days. Using ultra-high performance liquid chromatography quadrupole/electrostatic field orbital trap high-resolution mass spectrometry(UHPLC-HESI-QE-Orbitrap-MS/MS) metabolomics technology and 16S rRNA high-throughput sequencing technology, changes in endogenous small molecule substances and gut microbiota in mouse intestines were determined, and potential biomarkers were identified. The results showed that Jingfang Granules can regulate 11 biomarkers, including L-glutamic acid, succinic acid, arachidonic acid, linoleic acid, linolenic acid, phenylalanine, sphingosine, 2-hydroxy-2-methyl butyric acid, pyruvate, tryptophan, and palmitic acid. Metabolic pathway analysis was conducted on these 11 biomarkers using the online software MetaboAnalyst, identifying potential major metabolic pathways. Among them, a total of 10 metabolic pathways are closely related to the treatment of acute lung injury with Jingfang Granules, including alanine, aspartate and glutamate metabolism, aminoacyl-tRNA biosynthesis, citrate cycle(TCA cycle), alyoxylate and dicarboxylate metabolism, arginine and proline metabolism, linoleic acid metabolism and linolenic acid metabolism, nitrogen metabolism, D-glutamine and D-gluta-matemetabolism, phenylalanine, tyrosine and tryptophan biosynthesis, phenylalanine metabolism. The results of gut microbiota showed significant differences in bacteria, mainly including Bacteroides, Akkermansia, Lachnospiraceae＿NK4A136＿group, Lachnochlostridium, and Klebsiella. Spearman analysis confirms that Akkermansia and Lachnospiraceae＿NK4A136＿group is a significant positive correlation between the abundance of succinic acid, arachidonic acid, linolenic acid, linoleic acid, butyric acid, and pyruvate in the group; Bacteroides, Klebsiella, Lachnochlostrium are significantly positively correlated with the abundance of L-glutamic acid, phenylalanine, and sphingosine. The above results indicate that the therapeutic effect of Jingfang Granules on acute lung injury is achieved by improving the imbalance of gut microbiota in mice with acute lung injury, balancing the metabolism of alanine, biosynthesis of aminoacyl tRNA, aspartic acid, glutamate, tricarboxylic acid cycle, biosynthesis of phenylalanine, tyrosine, tryptophan, and metabolism of linoleic acid.