IntroductionGut microbiome affecting the responses to immune checkpoint inhibitors against advanced NSCLC has been investigated in the Western population. However, considering pre-existing genetic and gut microbiota variation, the relevance remains unknown in the East-Asian NSCLC population. This study is designed to explore the relationship between gut microbiome and clinical outcomes in Chinese patients with NSCLC who have received treatment using an anti–programmed death 1 (PD-1) blockade.MethodsThirty-seven patients with advanced NSCLC receiving treatment with nivolumab were enrolled in CheckMate 078 (NCT02613507) and CheckMate 870 (NCT03195491). Fecal samples were collected at the starting point, when patients received nivolumab, at clinical evaluation, and when disease progression was noted. 16S ribosome RNA gene sequencing was applied to assess gut microbiota profiles. Peripheral immune signatures were determined by multicolor flow cytometry in parallel.ResultsWhen subgrouping patients into responder (R) and nonresponder according to the clinical response assessed using Response Evaluation Criteria in Solid Tumor version 1.1, R patients harbored higher diversity of gut microbiome at the starting point with stable composition during the treatment. Patients with high microbiome diversity had significantly prolonged progression-free survival when compared to those with low diversity. Compositional difference was observed between the two groups as well with the enrichment of Alistipes putredinis, Bifidobacterium longum, and Prevotella copri in R whereas Ruminococcus_unclassified enriched in nonresponding patients. Analysis of systemic immune responses using multicolor flow cytometry revealed that patients with a high abundance of microbiome diversity in the gut had a greater frequency of unique memory CD8+ T cell and natural killer cell subsets in the periphery in response to anti–PD-1 therapy.ConclusionsOur results reveal strong correlation between gut microbiome diversity and the responses to anti–PD-1 immunotherapy in Chinese patients with advanced NSCLC. Patients with favorable gut microbiome (such as those with high diversity) exhibit enhanced memory T cell and natural killer cell signatures in the periphery. These findings provide important implications for the prediction and the evaluation of anti–PD-1 immunotherapy against NSCLC in the Chinese population.

Tumor metastasis involves a series of biological steps during which the tumor cells acquire the ability to invade surrounding tissues and survive outside the original tumor site. During the early stages, the cancer cells undergo an epithelial-mesenchymal transition (EMT). Wnt/β-catenin signaling is known to drive EMT and metastasis. Here we report that Wnt/β-catenin signaling is hyperactivated in metastatic breast cancer cells that express microRNA 374a (miR-374a). In breast cancer cell lines, ectopic overexpression of miR-374a promoted EMT and metastasis both in vitro and in vivo. Furthermore, miR-374a directly targeted and suppressed multiple negative regulators of the Wnt/β-catenin signaling cascade, including WIF1, PTEN, and WNT5A. Notably, miR-374a was markedly upregulated in primary tumor samples from patients with distant metastases and was associated with poor metastasis-free survival. These results demonstrate that miR-374a maintains constitutively activated Wnt/β-catenin signaling and may represent a therapeutic target for early metastatic breast cancer.

Background Sarcopenia is a condition characterized by the age-related loss of skeletal muscle mass and function. The pathogenesis of the disease is influenced by chronic low-grade inflammation. However, the specific changes in the immune landscape changes of sarcopenic muscle are not yet fully understood. Methods To gain insights into the immune cell composition and interactions, we combined single-nucleus RNA sequencing data, bulk RNA sequencing dataset, and comprehensive bioinformatic analyses on the skeletal muscle samples from young, aged, and sarcopenic individuals. Histological staining was then performed on skeletal muscles to validate the distribution of immune cells in clinical samples. Results We analyzed the transcriptomes of 101,862 single nuclei, revealing a total of 10 major cell types and 6 subclusters of immune cell types within the human skeletal muscle tissues. Notable variations were identified in the immune microenvironment between young and aged skeletal muscle. Among the immune cells from skeletal muscle microenvironment, macrophages constituted the largest fraction. A specific marker gene LYVE1 for skeletal muscle resident macrophages was further identified. Cellular subclasses included four distinct groups of resident macrophages, which play different roles in physiological or non-physiological conditions. Utilizing bulk RNA sequencing data, we observed a significant enrichment of macrophage-rich inflammation in sarcopenia. Conclusions Our findings demonstrate age-related changes in the composition and cross-talk of immune cells in human skeletal muscle microenvironment, which contribute to chronic inflammation in aged or sarcopenia muscle. Furthermore, macrophages emerge as a potential therapeutic target, thus advancing our understanding of the pathogenesis of sarcopenia.

Background:

 Rheumatoid arthritis (RA) is a female predominant autoimmune disease. The peak incidence coincides with menopause years in female RA. However, the exact interval between the age of RA onset and menopause was unclear in RA. Early menopause (EM, menopause age ≤ 45 years) was associated with almost 2.4-fold risk of subsequent development of RA. Since symptoms of somatoform autonomic dysfunction arose from menopause transition, post-menopause especially EM might exert a negative impact on disease characteristics especially patient-reported outcomes (PROs) of RA. However, published data were controversial. 

Objectives:

 This study aims to illustrate the distribution of time interval between age of RA onset and menopause and assess the differences of disease characteristics especially PROs between RA patients with natural EM and usual menopause (UM, menopause age > 45 years). 

Methods:

 This cross-sectional study included post-menopausal RA patients from an observational RA cohort which conducted at the Department of Rheumatology and Immunology, Sun Yat-Sen memorial Hospital, Guangdong, China between January, 2015 and October, 2023. RA patients were divided into EM and UM groups. PROs were assessed, including patient global assessment of disease activity (PtGA), pain visual analogue scale (VAS) and Stanford health assessment questionnaire disability index (HAQ-DI). PROs-associated indicators included 28-joint tender joint count (TJC28) and provider global assessment of disease activity (PrGA). The interval time (years) from RA onset to menopause was calculated by age of menopause minus age of RA onset. Patients with first arthritis symptom occurred at 1 year after natural menopause were categorized into patients with RA onset after menopause, otherwise, those were categorized into patients with RA onset before menopause. 

Results:

 ① Among 557 post-menopausal patients enrolled, their peak RA-onset age was 51-55 years, while the peak menopause age was 46-50 years. Their mean age of menopause was 49.0 ± 4.2 years, while the peak age of menopause was 46-50 years. Both the age of RA onset and menopause showed unimodal distribution. The incidence peak of RA was 5 years after menopause (Figure 1A and B). ②There were 98 (17.6%) EM patients. Compared with UM patients, RA patients with EM had worse PROs and PROs-associated indicators, higher C reactive protein and CDAI (all P < 0.05, Table 1), but not radiographic indicators (all P > 0.05). ③ Among patients with RA onset after menopause, EM patients (18.0%) were characterized with higher TJC28, PrGA, PtGA, HAQ-DI and higher CDAI than those with UM (all P < 0.05), but not inflammatory and radiographic indicators (all P > 0.05). ④Among patients with RA onset before menopause, there were no differences of PROs and PROs-associated indicators, functional or radiographic indicators between patients with EM and UM. 

Conclusion:

 Our results supported that the peak years of RA onset in women coincided with the menopausal transition, which was demonstrated after 5 years of natural menopause. RA patients with EM especially in those with postmenopausal-onset RA had worse PROs, but neither inflammation nor radiographic damage. Therefore, improvement of self-management and psychosocial supports based on the well-control of RA disease activity would be more important and beneficial for EM patients with RA. 

REFERENCES:

 NIL. 

Acknowledgements:

 NIL. 

Disclosure of Interests:

 None declared.

Non-small cell lung cancer (NSCLC) patients with EGFR mutations exhibit an unfavorable response to immune checkpoint inhibitor (ICI) monotherapy, and their tumor microenvironment (TME) is usually immunosuppressed. TGF-β plays an important role in immunosuppression; however, the effects of TGF-β on the TME and the efficacy of anti-PD-1 immunotherapy against EGFR-mutated tumors remain unclear.

The first barrier of the human body is the skin, and more serious harm may occur when skin wound healing is delayed. One of the components of enamel matrix proteins is amelogenin, which inhibits inflammation and promotes periodontal tissue regeneration. However, its role in skin wound healing and angiogenesis is inconclusive. Thus, this study aimed to assess the therapeutic effect of recombinant human amelogenin (rhAM) on mouse skin wounds and to determine its effect on angiogenesis and its underlying mechanism. rhAM was expressed in Escherichia coli and purified using the optimized acetic acid method. A skin injury mouse model was established to explore the effects of rhAM on skin wound healing. After treatment with rhAM for 7 days, the wound healing rate was calculated, and the therapeutic effect of rhAM on skin wounds was assessed using hematoxylin & eosin (HE), Masson, and CD31 immunofluorescence staining. The expression of growth and inflammatory factors in wound tissues were detected using Western Blot. In addition, the rhAM effects on the proliferation and migration of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) and mouse fibroblasts (NIH 3T3) were studied in vitro using the Cell Counting Kit-8, cell scratch, cytoskeleton staining, and qPCR. The rhAM effect on HUVEC angiogenesis and its potential mechanism was studied using tube formation and Western Blot. The results showed that the purity of the obtained rhAM was more than 90 % using the optimized acetic acid method, and high-dose rhAM treatment could improve wound healing rate in mice. Additionally, more blood vessels and collagen were produced in the skin wound, and the expression of angiopoietin-related protein 2 (ANGPTL2) and transforming growth factor (TGF)-β1 was upregulated; however, that of interleukin-6 was down-regulated. We also found that rhAM promoted the proliferation and migration of HUVEC and NIH 3T3, the mRNA levels of vascular endothelial growth factor (VEGF), fibroblast growth factor, TGF-β1 and ANGPTL2 in HUVEC cells were upregulated, and expression of VEGF and phosphorylation of the p38 mitogen-activated protein kinase were activated. Therefore, rhAM could promote skin wound healing by upregulating angiogenesis and inhibiting inflammation.