The human estrogen receptor (hER) exists as two subtypes, hER α and hER β, that differ in the C-terminal ligand-binding domain and in the N-terminal transactivation domain. In this study, we investigated the estrogenic activities of soy isoflavones after digestion with enteric bacteria in competition binding assays with hER α or hER β protein, and in a gene expression assay using a yeast system. The estrogenic activities of these isoflavones were also investigated by the growth of MCF-7 breast cancer cells. Isoflavone glycoside binds weakly to both receptors and estrogen receptor-dependent transcriptional expression is poor. The aglycones bind more strongly to hER β than to hER α. The binding affinities of genistein, dihydrogenistein and equol are comparable to the binding affinity of 17 β-estradiol. Equol induces transcription most strongly with hER α and hER β. The concentration required for maximal gene expression is much higher than expected from the binding affinities of the compounds, and the maximal activity induced by these compounds is about half the activity of 17 β-estradiol. Although genistin binds more weakly to the receptors and induces transcription less than does genistein, it stimulates the growth of MCF-7 cells more strongly than does genistein.

We investigated the estrogenic activities of isoflavone derivatives in competition binding assays with human estrogen receptor (hER) alpha or hER beta protein, and in a gene expression assay using a yeast system. Coumestrol binds as strongly as 17beta-estradiol to both hERs. Biochanin A, 5-OMe-genistein, formononetin, and tectorigenin bind well to hER beta, but significant binding to hER alpha is only observed with 5-OMe-genistein, formononetin and tectorigenin. The binding of 7-OMe-genistein and irisolidone is poor to both receptors. Among the glucosides, sissotorin binds both receptors and the binding is stronger than genistin. Coumestrol induces transcription as strongly as genistein. Tectorigenin also induces transcription with both hERs. Though biochanin A, 5-OMe-genistein, 7-OMe-genistein, irisolidone and formononetin slightly induce transcription with hER beta, they act as antagonists in the induction of transcription by 17beta-estradiol. The results show that methylation or glucosidation of isoflavones generally inhibits their phytoestrogenic activities.

4176 Background: Small bowel adenocarcinoma (SBA) is a rare cancer and improved treatment strategies are needed. To explore potential targets of existing antibody drugs for SBA, we examined the protein expression of Claudin 18.2, Nectin-4, HER-3, and PD-L1 in SBA and analyzed the associated clinicopathological features and prognosis. Methods: We retrospectively reviewed patients diagnosed with SBA who underwent adjuvant or palliative chemotherapy between July 2010 and July 2023 at our hospital. Immunohistochemistry staining of Claudin 18.2, Nectin-4, HER-3, and PD-L1 was performed for pathological samples. We also assessed overall survival (OS) in patients receiving palliative chemotherapy to examine the association between prognosis and expression of each protein, excluding patients with microsatellite instability-high (MSI-H) treated with immunotherapy. Results: Pathological samples and clinical data were available for 51 patients aged 23–82 years. The primary lesion was in the duodenum in 49% of these patients and in the jejunum or ileum in 51%. There was no recurrence after surgery and adjuvant chemotherapy in 12% of the patients, while 88% received oxaliplatin-based palliative chemotherapy for unresectable SBA. Among those with unresectable SBA, 4 (8%) had MSI-H and were treated with immunotherapy. Claudin 18.2, Nectin-4, and HER-3 positivity was 35%, 82%, and 88%, respectively. All cases had expression of at least one of these molecules, and 25% had expression of all three. Two molecules were co-expressed in 55% of the patients, most frequently Nectin-4 and HER-3. Nectin-4 expression was observed in all primary lesions in the jejunum or ileum (100%), compared with 60% in the duodenum ( p < 0.001). The distribution of combined positive score (CPS) for PD-L1 was < 1, 1-5, and ≥ 5 for 33%, 32%, and 35%, respectively. CPS was higher in Nectin-4 positive samples compared with negative samples (median CPS 2.5% vs 0%, p = 0.077). Among patients receiving palliative chemotherapy, OS did not differ according to the Claudin 18.2 expression (17.0 vs. 13.7 months, HR 0.91, p = 0.800) or HER-3 expression (17.0 vs. 9.7 months, HR 0.40, p = 0.166). However, patients with Nectin-4 expression had significantly shorter OS than those without Nectin-4 expression (12.6 vs. 43.2 months, HR 5.12, p = 0.006). Similarly, OS was shorter in patients with PD-L1 CPS ≥ 5 compared with CPS < 5 (9.7 vs. 18.0 months, HR 2.60, p = 0.028). Multivariate analysis revealed that Nectin-4 expression (HR 4.55, p = 0.020) was an independent adverse prognostic factor for OS. Conclusions: Claudin 18.2, Nectin-4, and HER-3 are highly expressed in SBA, indicating they are potential targets for existing antibody drugs. In particular, Nectin-4-positive SBA exhibited poor prognosis and high PD-L1 expression, suggesting that a combination of immunotherapy and Nectin-4-targeting therapy may be effective.

Abstract Background Nivolumab was approved for the treatment of advanced gastric cancer in 2017 in Japan. The aim of this study was to assess the impact of nivolumab in a real‐world clinical setting. Methods This single‐institutional retrospective study included patients with advanced gastric or esophagogastric junction adenocarcinoma and a history of first‐line chemotherapy with platinum‐based doublet or triplet regimens between 2010 and 2020. To assess the impact of nivolumab on survival, the patients were divided based on the year of nivolumab approval into a pre‐2017 (2010–2016) group and a post‐2017 (2017–2020) group. Results From a total of 1918 patients, 1093 were excluded. There were 533 patients in the pre‐2017 group and 292 in the post‐2017 group. Immune checkpoint inhibitors were used significantly more often in the post‐2017 group than in the pre‐2017 group (8.6% vs. 47.9%). Median overall survival was significantly longer in the post‐2017 group (16.9 vs. 13.9 months; hazard ratio [HR] 0.75, 95% confidence interval [CI] 0.63–0.90; p < 0.01). The proportion of patients transitioning to third‐line treatment was higher in the post‐2017 group than in the pre‐2017 group (56.3% vs. 43.8%, p < 0.01). Median survival outcomes following progression on second‐line treatment were significantly longer in the post‐2017 group (4.3 vs. 3.2 months; HR 0.70, 95% CI 0.57–0.86; p < 0.01). Conclusion The proportion of patients transitioning to third‐line treatment and survival outcomes following progression on second‐line treatment have improved since the approval of nivolumab. This drug might help to prolong overall survival in real‐world practice.