The mixed lineage kinase domain-like protein (MLKL) has recently been identified as a key RIP3 (receptor interacting protein 3) downstream component of tumour necrosis factor (TNF)-induced necroptosis. MLKL is phosphorylated by RIP3 and is recruited to the necrosome through its interaction with RIP3. However, it is still unknown how MLKL mediates TNF-induced necroptosis. Here, we report that MLKL forms a homotrimer through its amino-terminal coiled-coil domain and locates to the cell plasma membrane during TNF-induced necroptosis. By generating different MLKL mutants, we demonstrated that the plasma membrane localization of trimerized MLKL is critical for mediating necroptosis. Importantly, we found that the membrane localization of MLKL is essential for Ca2+ influx, which is an early event of TNF-induced necroptosis. Furthermore, we identified that TRPM7 (transient receptor potential melastatin related 7) is a MLKL downstream target for the mediation of Ca2+ influx and TNF-induced necroptosis. Hence, our study reveals a crucial mechanism of MLKL-mediated TNF-induced necroptosis. Liu and colleagues find that MLKL translocates to the plasma membrane to induce TNF-induced necroptosis, possibly through an effect on calcium influx and the action of the cation channel TRPM7.

The mechanism by which ECM elasticity induces lineage specification of stem cells has not been clearly understood. Integrins are well-documented mechanosensors that are positioned at the beginning of the sensing pathway. By using an antibody specifically recognizing the active conformation of β1 integrin, we observed that β1 integrin activation in bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSCs) was induced by soft substrate to a significantly greater degree than by stiff substrate. In contrast, however, the level of cell surface integrin on soft substrate was significantly lower than that on stiff substrate. Soft substrate markedly enhanced the internalization of integrin, and this internalization was mediated mainly through caveolae/raft-dependent endocytosis. The inhibition of integrin internalization blocked the neural lineage specification of BMMSCs on soft substrate. Furthermore, soft substrate also repressed the bone morphogenetic protein (BMP)/Smad pathway at least partially through integrin-regulated BMP receptor endocytosis. A theoretical analysis based on atomic force microscopy (AFM) data indicated that integrin–ligand complexes are more easily ruptured on soft substrate; this outcome may contribute to the enhancement of integrin internalization on soft substrate. Taken together, our results suggest that ECM elasticity affects integrin activity and trafficking to modulate integrin BMP receptor internalization, thus contributing to stem cell lineage specification.

This article presents the distinctive butyrylcholinesterase (BChE) fluorescent probe P5, designed via a targeting-site method. This method was proposed to enhance the affinity of the probe for BChE by targeting the peripheral anionic site (PAS) of BChE. By mimicking the natural substrate butyrylcholine, the structure of the probe was optimized by introducing a positive charge. Fluorescent probe P5, selected from a series of designed fluorescent probes P1–P6, exhibited excellent affinity and specificity towards BChE, enabling rapid detection within 5 min with a low detection limit of 16.7 ng/mL. Furthermore, this probe can distinguish between normal cells and Alzheimer’s disease (AD) model cells, and demonstrated good imaging results in a P12 cell AD model. The results of this study indicate that this novel fluorescent probe could serve as a promising tool for the rapid detection of BChE and accurate AD diagnosis.

Houttuynia cordata Thunb., also known as Yuxingcao in Chinese, occupies a pivotal role in Asian traditional medicine and cuisine. The aerial parts and underground stems of H. cordata exhibit remarkable chemical diversity, particularly in essential oil. Nevertheless, the mechanisms regulating essential oil biosynthesis in H. cordata remain unclear. In this study, we present a quantitative overview of the proteomes across four tissues (flower, stem, leaf, and underground stem) of H. cordata , achieved through the application of the isobaric tag for relative and absolute quantitation (iTRAQ). Our research findings indicate that certain crucial ribosomal proteins and their interactions may significantly impact the production of essential oils in H. cordata . These results offer novel insights into the roles of ribosomal proteins and their associations in essential oil biosynthesis across various organisms of H. cordata .

<p>Prediction models play a pivotal role in medical practice. To ensure their clinical applicability, it is essential to guarantee the quality of predictive models at multiple stages. In this article, we propose twelve recommendations for the development and clinical implementation of prediction models. These include identifying clinical needs, selecting appropriate predictors, performing predictor transformations and binning, specifying suitable models, assessing model performance, evaluating reproducibility and transportability, updating models, conducting impact evaluations, and promoting model adoption. These recommendations are grounded in a comprehensive synthesis of insights from existing literature and our extensive clinical and statistical experience in the development and practical application of prediction models.</p>

Motivation: Atrophy and hyperactivity of the anterior cingulate gyrus (ACC) are key drivers of irritable bowel syndrome (IBS) and its psychiatric comorbidity. Goal(s): Resting-state fMRI was performed to observe the functional connectivity (FC) patterns of ACC subregions in IBS with depressive symptoms patients to explore the potential neural mechanism of IBS and its comorbidity depression. Approach: Seed-based whole-brain FC analysis was performed and distinct subregions of ACC showed different whole-brain connectivity patterns in IBS patients. Results: The aberrant FC within the emotional arousal network, salience network and executive network may be characteristic neurobiological markers of IBS with comorbidity depression. Impact: The aberrant FC within the emotional arousal network may be a characteristic neurobiological marker of IBS with comorbidity depression. In addition, the abnormal FC between the salience network and the executive network may be the underlying neural mechanism of IBS.

Herb-induced liver injury (HILI) represents an exacerbated inflammatory response, with Psoraleae fructus (PF) and its preparations recently associated with hepatotoxicity. Licorice, historically recognized as a detoxifying herbal remedy, is considered to possess hepatoprotective properties. Our previous research identified bavachin, bakuchiol, and psoralidin (PSO) as potential toxic constituents in PF, while licochalcone B (LCB) and echinatin were identified as bioactive components in licorice. However, evidence regarding the interactions of active compounds in herbs and their underlying mechanisms remains limited.

Abstract The rapid and accurate detection of illegal adulteration of chemical drugs into dietary supplements is a big challenge in the food chemistry field. Detection of compounds without a standard reference is even more difficult; however, this is a common situation. Here in this study, a novel “standard‐free detection of adulteration” (SFDA) method was proposed and phosphodiesterase‐5 inhibitor derivatives were used as an example to figure out the possibility and reliability of this SFDA method. After analysis by quadrupole coupled time of flight–tandem mass spectrometry detection and multivariable statistics, six common fragment ions were chosen to indicate whether adulteration was present or not, while 20 characteristic fragment ions indicated whether adulteration was by nitrogen‐containing heterocycles or by anilines. Furthermore, the quantitative methods were conducted by high‐performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry. In a word, this strategy allows for a quick determination of dietary supplement adulteration without any need for standard materials, improving the efficacy of food safety testing.