Abstract Background While NTRK fusion-positive cancers can be exquisitely sensitive to first-generation TRK inhibitors, resistance inevitably occurs, mediated in many cases by acquired NTRK mutations. Next-generation inhibitors (e.g., selitrectinib, repotrectinib) maintain activity against these TRK mutant tumors; however, there are no next-generation TRK inhibitors approved by the FDA and select trials have stopped treating patients. Thus, the identification of novel, potent and specific next-generation TRK inhibitors is a high priority. Methods In silico modeling and in vitro kinase assays were performed on TRK wild type (WT) and TRK mutant kinases. Cell viability and clonogenic assays as well as western blots were performed on human primary and murine engineered NTRK fusion-positive TRK WT and mutant cell models. Finally, zurletrectinib was tested in vivo in human xenografts and murine orthotopic glioma models harboring TRK-resistant mutations. Results In vitro kinase and in cell-based assays showed that zurletrectinib, while displaying similar potency against TRKA, TRKB, and TRKC WT kinases, was more active than other FDA approved or clinically tested 1 st - (larotrectinib) and next-generation (selitrectinib and repotrectinib) TRK inhibitors against most TRK inhibitor resistance mutations (13 out of 18). Similarly, zurletrectinib inhibited tumor growth in vivo in sub-cute xenograft models derived from NTRK fusion-positive cells at a dose 30 times lower when compared to selitrectinib. Computational modeling suggests this stronger activity to be the consequence of augmented binding affinity of zurletrectinib for TRK kinases. When compared to selitrectinib and repotrectinib, zurletrectinib showed increased brain penetration in rats 0.5 and 2 h following a single oral administration. Consistently, zurletrectinib significantly improved the survival of mice harboring orthotopic NTRK fusion-positive, TRK-mutant gliomas (median survival = 41.5, 66.5, and 104 days for selitrectinib, repotrectinib, and zurletrectinib respectively; P < 0.05). Conclusion Our data identifies zurletrectinib as a novel, highly potent next-generation TRK inhibitor with stronger in vivo brain penetration and intracranial activity than other next-generation agents.

Purpose: To evaluate changes of hydroxyproline concentration and its influencing factors of small incision lenticule extraction (SMILE)-derived corneal stromal lenticules with different preservation methods. Methods: A total of 390 corneal stromal lenticules of 195 patients were derived from SMILE surgeries. Thirty of the lenticules were classified as the fresh (control) group, and the rest were randomly and evenly divided and stored in anhydrous glycerol, silicone oil, Optisol, and cryopreservation for 1 day, 1 week, or 1 month. A hydroxyproline assay kit (ab222941, Abcam) was used to measure the hydroxyproline concentration in each preservation method. Concentrations of MMP-2, TIMP-2, TNFα, TGFβ2, and reactive oxygen species were also evaluated. Results: In the anhydrous glycerol group, the concentration of hydroxyproline decreased within 1 week (fresh: 1 dΔ = 0.229, P < 0.001*; 1 d − 1 wΔ = 0.055, P < 0.001*) while that in the silicone oil group remained stable in 1 week (1 d − 1 wΔ = −0.005, P = 0.929) and decreased significantly in 1 m (1 m − 1 wΔ = −0.041, P = 0.003*). The sequence of hydroxyproline concentration in the Optisol group was 1 m > 1 day > 1 week. Hydroxyproline concentration in the cryopreservation group decreased within 1 m. Hydroxyproline concentration was highest in the Optisol group and lowest in the anhydrous glycerol group under the same preservation time. Hydroxyproline concentration was negatively correlated with MMP-2 (r = −0.16, P = 0.421) and TIMP-2 (r = −0.56, P = 0.002*) while MMP-2 and TNFα (r = 0.17, P = 0.242), TIMP-2 and TGFβ2 (r = 0.21, P = 0.207), and TNFα and reactive oxygen species (r = 0.52, P = 0.007*) were positively correlated. Conclusions: More collagen was retained in SMILE lenticules preserved in Optisol under the same preservation time. The mechanism of the changes of collagen in preserved SMILE-derived lenticules and oxidative stress requires additional investigation.

Purpose: To explore the use of autologous astigmatic lenticule reshaping and rotation surgery to correct high astigmatism in conjunction with excimer laser technology to correct residual refractive error. Methods: Six patients with high astigmatism (8 eyes, all with astigmatism from −5.50 to −11.00 diopters [D]) seeking refractive error correction were enrolled. The following methods were used to correct refractive errors that could not be corrected by a single conventional surgery: (1) cutting of a customized lens using FLEx technology, (2) lifting of the corneal flap and reshaping the autologous astigmatic lenticule in situ using an excimer laser, and (3) rotation of the autologous astigmatic lenticule by 90°. Uncorrected distance visual acuity, subjective refraction, corneal topography, and anterior segment optical coherence tomography were performed preoperatively and postoperatively. Results: The efficacy and safety indices at 6 months postoperatively were 0.93 ± 0.18 and 1.06 ± 0.11, respectively, the spherical equivalent remained stable and close to emmetropia (−0.13 ± 0.70 D) from 1 to 6 months postoperatively, postoperative astigmatism was generally mildly undercorrected (−1.22 ± 0.43 D), and the difference in corneal curvatures at 2 mm from the apex of the cornea was significantly reduced compared to preoperatively ( P < .05); however, the corresponding values at 1 and 3 mm showed no difference. Conclusions: Correction of high astigmatism with autologous astigmatic lenticule reshaping and rotation surgery is tissue-sparing, predictable, and significantly improves postoperative visual acuity and quality. This method is feasible and safe, with predictability requiring further study. This novel surgical approach has potential for patients with high astigmatism that cannot be corrected by conventional refractive surgery. [ J Refract Surg . 2024;40(8):e554–e561.]