Plant respiratory burst oxidase homolog (rboh) proteins, which are homologous to the mammalian 91-kDa glycoprotein subunit of the phagocyte oxidase (gp91^phox) or NADPH oxidase 2 (NOX2), have been implicated in the production of reactive oxygen species (ROS) both in stress responses and during development. Unlike mammalian gp91^phox/NOX2 protein, plant rboh proteins have hydrophilic N-terminal regions containing two EF-hand motifs, suggesting that their activation is dependent on Ca²⁺. However, the significance of Ca²⁺ binding to the EF-hand motifs on ROS production has been unclear. By employing a heterologous expression system, we showed that ROS production by Arabidopsis thaliana rbohD (AtrbohD) was induced by ionomycin, which is a Ca²⁺ ionophore that induces Ca²⁺ influx into the cell. This activation required a conformational change in the EF-hand region, as a result of Ca²⁺ binding to the EF-hand motifs. We also showed that AtrbohD was directly phosphorylated in vivo, and that this was enhanced by the protein phosphatase inhibitor calyculin A (CA). Moreover, CA itself induced ROS production and dramatically enhanced the ionomycin-induced ROS production of AtrbohD. Our results suggest that Ca²⁺ binding and phosphorylation synergistically activate the ROS-producing enzyme activity of AtrbohD.

Sarcoidosis is a systemic granulomatous disease; however, the incidence of bone sarcoidosis is relatively rare. The short tubular bones of the hands and feet are most frequently affected, while the vertebrae and the pelvic bones are rarely involved. We hereby report a rare case of multiple bone sarcoidosis involving the vertebrae and pelvic bones, evaluated before and after steroid therapy using two different imaging modalities: bone scintigraphy and A 18F-fluorodeoxyglucose positron emission tomography combined with computed tomography (FDG-PET/CT). FDG-PET/CT is effective for detecting bone lesions; however, whole-body imaging is recommended to detect the short tubular bones of the hands and feet, which are most frequently affected.