Virulence pathways in pathogenic bacteria are regulated by quorum sensing mechanisms, particularly biofilm formation through autoinducer production and sensing. In this study, the culture filtrate extracted from an edible mushroom, Agaricus subrutilescens, was fractionated to isolate a compound that inhibits biofilm formation. Four gram-negative bacteria (Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Proteus mirabilis, and Enterobacter cloacae) and two gram-positive bacteria (Enterococcus faecalis and Staphylococcus aureus) were used for the bioassay. The bioassay-guided chromatographic separations of the culture filtrate extract resulted in the isolation of the compound. Further, spectroscopic analyses revealed the identity of the compound as 2,2'-azoxybisbenzyl alcohol (ABA). The minimum inhibitory and sub-inhibitory concentrations of the compound were also determined. ABA was significantly effective in inhibiting biofilm formation in all tested bacteria, with half-maximal inhibitory concentrations of 3-11 µg/mL. Additionally, the bioactivity of ABA was confirmed through the bioassays for the inhibition of exopolysaccharide matrixes and autoinducer activities.

Abstract Aims Anthracnose caused by Colletotrichum species is one of the most devastating diseases of fruits and crops. We isolated and identified an antifungal compound from the mushroom Coprinus comatus and investigated its inhibitory potential against anthracnose disease-causing fungi with the goal of discovering natural products that can suppress anthracnose-caused plant disease. Methods and results The culture filtrate of C. comatus was subjected to a bioassay-guided isolation of antifungal compounds. The active compound was identified as orsellinaldehyde (2,4-dihydroxy-6-methylbenzaldehyde) based on mass spectroscopy and nuclear magnetic resonance analyses. Orsellinaldehyde displayed broad-spectrum inhibitory activity against different plant pathogenic fungi. Among the tested Colletotrichum species, it exhibited the lowest IC50 values on conidial germination and germ tube elongation of Colletotrichum orbiculare. The compound also showed remarkable inhibitory activity against Colletotrichum gloeosporiodes. The staining of Colletotrichum conidia with fluorescein diacetate and propidium iodide demonstrated that the compound is fungicidal. The postharvest in-vivo detached fruit assay indicated that orsellinaldehyde suppressed anthracnose lesion symptoms on mango and cucumber fruits caused by C. gloeosporioides and C. orbiculare, respectively. Conclusions Orsellinaldehyde was identified as a potent antifungal compound from the culture filtrate of C. comatus. The inhibitory and fungicidal activities of orsellinaldehyde against different Colletotrichum species indicate its potential as a fungicide for protecting various fruits against anthracnose disease-causing fungi.

Abstract Circadian rhythms are biological systems that provide approximately 24-hour cycles for the behavior and physiological functions of organisms. As diverse modern lifestyles often cause disturbances in circadian rhythms, new approaches to their regulation are required. Therefore, new compounds that affect circadian rhythms have been explored in edible mushrooms. The extract from the culture filtrate of Cyclocybe cf. erebia showed activity that advanced the circadian rhythm in a bioassay with mouse fibroblasts expressing the LUCIFERASE protein under the control of the Period2 promoter. Bioassay-guided fractionation of the extract resulted in the isolation of the compound. Spectroscopic analyses identified the compound as a phthalide derivative, and the compound was named cyclocybelide. Treatment of mouse fibroblasts with the compound shifted the circadian rhythm forward, irrespective of the timing of treatment. In addition, some phthalide derivatives with hydroxy and methoxy groups showed similar effects on circadian rhythms.