To determine the efficacy of manuka honey against multidrug-resistant (MDR) and extensively drug-resistant (XDR) clinical strains of

Klebsiella pneumoniae is notorious for causing healthcare-associated infections, which become more complicated by the acquisition of bla NDM genes via mobile genetic elements. Although Pakistan is a well-established hot spot of bla NDM -positive K. pneumoniae, detailed molecular descriptions of bla NDM -carrying plasmids are scarce. Seven K. pneumoniae isolates harboring bla NDM were recovered from clinical sample sources during a six-month period and tested for antimicrobial susceptibility. A long-read approach was used for whole genome sequencing to obtain circularized plasmids and chromosomes for typing, annotation, and comparative analysis. The isolates were susceptible to colistin and tigecycline only among the tested antibiotics. We identified five STs: ST11, ST16, ST716, ST464, and ST2856. Notably, three strains possessed the hypervirulent capsule KL2, while five were classified as O locus type O2a. Evidence of genetic diversity was further highlighted by the presence of four IncC plasmids harboring bla NDM-1 , two IncX3 plasmids harboring bla NDM-5 , and a single hybrid IncFIB/IncHI1B plasmid harboring bla NDM-7 . These plasmids also carried additional ARGs conferring resistance to aminoglycosides, cephalosporins, and fluoroquinolones. We identified the plasmidome of the K. pneumoniae isolates and characterized the NDM-carrying plasmids. Genetic analysis confirmed the presence of bla NDM-1 and bla NDM-5 on broad host range plasmids and bla NDM-7 in a previously unreported hybrid plasmid backbone. We emphasized the critical role of plasmids in spreading bla NDM in the clinical setting in Pakistan. Hence, we stressed the urgent need for enhanced surveillance, not least in LMICs, infection control measures, and adherence to the AWaRe guidelines in antibiotics use.

The increasing prevalence of Botrytis cinerea infections has accelerated the need for effective antifungal agents. Traditional chemical methods are often associated with environmental harm, making the green synthesis of nanoparticles an attractive alternative. This study aimed to synthesize and characterize silver nanoparticles (AgNPs) using extracts from three medicinal plants - Amaranthus viridis L., Mentha piperita L., and Ocimum basilicum L. - and evaluate their antifungal efficacy against Botrytis cinerea. AgNPs were synthesized using methanol extracts of the selected plants and characterized by Scanning Electron Microscopy (SEM), UV-visible spectroscopy, X-ray diffraction analysis (XRD), and Fourier-Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). The synthesized AgNPs exhibited peak UV-visible absorption at 425 nm, 400 nm, and 420 nm, and had average particle sizes of 1.2 nm, 21.5 nm, and 358 nm for A. viridis, M. piperita, and O. basilicum, respectively. At a concentration of 3%, the AgNPs inhibited B. cinerea growth by 51%, 40.4%, and 39%. Further, an ethyl acetate fraction from A. viridis displayed 50% fungal inhibition at a concentration of 0.20%. GC-MS analysis revealed 15 bioactive compounds in the extracts. The study confirms that AgNPs synthesized from medicinal plants exhibit significant antifungal properties, making them potential candidates for the development of eco-friendly antifungal agents. The findings offer a green and sustainable avenue for the development of new antifungal agents and suggest further studies to optimize the synthesis process and investigate the mechanisms of action.