The recent paradigm that endogenous collagenolytic and gelatinolytic activities derived from acid-etched dentin result in degradation of hybrid layers requires in vivo validation. This study tested the null hypothesis that there is no difference between the degradation of dentin bonded with an etch-and-rinse adhesive and that in conjunction with chlorhexidine, an MMP inhibitor, applied after phosphoric-acid-etching. Contralateral pairs of bonded Class I restorations in primary molars of clinical subjects were retrieved after a six-month period of intra-oral functioning and processed for transmission electron microscopy. Hybrid layers from the chlorhexidine-treated teeth exhibited normal structural integrity of the collagen network. Conversely, abnormal hybrid layers were seen in the control teeth, with progressive disintegration of the fibrillar network, to the extent that it was beyond detection by collagen staining. Self-destruction of collagen matrices occurs rapidly in resin-infiltrated dentin in vivo and may be arrested with the use of chlorhexidine as an MMP inhibitor.

Host-derived proteases have been reported to degrade the collagen matrix of incompletely-resin-infiltrated dentin. This study tested the hypothesis that interfacial degradation of resin-dentin bonds may be prevented or delayed by the application of chlorhexidine (CHX), a matrix metalloproteinase inhibitor, to dentin after phosphoric acid-etching. Contralateral pairs of resin-bonded Class I restorations in non-carious third molars were kept under intra-oral function for 14 months. Preservation of resin-dentin bonds was assessed by microtensile bond strength tests and TEM examination. In vivo bond strength remained stable in the CHX-treated specimens, while bond strength decreased significantly in control teeth. Resin-infiltrated dentin in CHX-treated specimens exhibited normal structural integrity of the collagen network. Conversely, progressive disintegration of the fibrillar network was identified in control specimens. Auto-degradation of collagen matrices can occur in resin-infiltrated dentin, but may be prevented by the application of a synthetic protease inhibitor, such as chlorhexidine.

To investigate the transdentinal effects of surface reaction-type pre-reacted glass-ionomer (S-PRG) fillers on odontoblast-like cells. An eluate of S-PRG fillers was obtained by dissolving the particles in distilled water (1:1 m/v). Dentin discs with similar permeability were mounted into artificial pulp chambers and MDPC-23 cells were seeded on their pulpal surface. The occlusal surface was treated with (n = 10): ultrapure water (negative control – NC), hydrogen peroxide (positive control – PC), S-PRG eluate exposure for 1 min (S-PRG 1 min), or S-PRG filler eluate exposure for 30 min (S-PRG 30 min). After 24 h, cell viability (alamarBlue) and morphology (SEM) were evaluated. The extract obtained from transdentinal diffusion was applied to MDPC-23 pre-cultured in plates for another 24 h to evaluate viability (alamarBlue, 1, 3, and 7 days), gene expression of Col1a1, Alpl, Dspp, and Dmp1 (RT-qPCR, 1 and 7 days), and mineralization (Alizarin Red, 7 days). Data were analyzed with ANOVA (α = 5 %). While S-PRG 1 min did not differ from NC, S-PRG 30 min reduced 17.9 % viability of cells from discs. S-PRG treatments resulted in low cell detaching from dentin, and the remaining cells exhibited typical morphology or minor cytoplasmic contraction. S-PRG 30 min slightly increased cell viability (6 %) 1 day after contact with the extract. S-PRG treatments upregulated the expression of the investigated genes, especially after 1 day. S-PRG 30 min stimulated mineralization activity by 39.7 %. S-PRG filler eluate does not cause transdentinal cytotoxicity on odontoblast-like cells, and long-term exposure can stimulate their dentinogenic-related mineralization activity. The transdentinal elution of ions from S-PRG fillers is not expected to be harmful to the dental pulp and may exert bioactive effects by inducing dentin matrix deposition through the metabolism of underlying odontoblasts.

To evaluate the influence of solvents on the mechanical stability and dentin sealing ability of adhesive interfaces produced on dry dentin after collagen biomodification with a proanthocyanidin-rich grape seed extract (GSE). Flat dentin surfaces (N = 120) were initially divided into 10 groups. After phosphoric acid etching for 15s, the etched dentin was treated with: water (control), 5 % ethanol, 90 % ethanol, 5 % acetone, 90 % acetone, and the same groups added with 5 % GSE. The treatments were kept on the etched dentin for 60s. Then, the teeth of each treatment were further divided into two groups. Thus, after rinsing, the dentin was kept moist (wet bonding) or air-dried for 60 s (dry bonding). A water-free two-step etch-and-rinse adhesive system (Optibond S, Kerr) was applied, and composite blocks were built up. The teeth were tested for bond strength (μTBS) immediately or after 12 months of aging. Considering the μTBS results, additional teeth were prepared for qualitative analysis of nanoleakage (NL; SEM) and hybrid layer permeability (CLSM). The μTBS data were analyzed with three-way RM ANOVA and Tukey (α = 0.05). The immediate μTBS did not differ among treatments for wet dentin. For dry dentin, GSE in 5 % ethanol or acetone presented the highest μTBS values, the latter similar to wet control. After 12 months, μTBS of GSE in 5 % ethanol or acetone were comparable to the immediate results for wet and dry techniques. These reduced NL and improved dentin sealing for both dentin wetness conditions like the immediate wet control. The application of 5 % GSE to etched dentin, either in 5 % ethanol or 5 % acetone, resulted in enhanced mechanical stability and dentin sealing of interfaces produced on dry dentin. Dentin biomodification with proanthocyanidin in the presence of ethanol or acetone makes bonding procedures less sensitive by eliminating the need to keep dentin wet and increasing the quality and stability of hybrid layers produced on dry etched dentin.

ABSTRACT Objectives To evaluate the color change and trans‐amelodentinal cytotoxicity of a 22% carbamide peroxide (CP) bleaching gel containing different concentration of manganese oxide (MnO 2 ). Material and Methods Enamel/dentin discs adapted to artificial pulp chambers were distributed according to treatments: CN—No treatment; CP22%–22%CP; CP22 + 2MnO 2 –22%CP + 2 mg/mLMnO 2 ; CP22% + 6MnO 2 –22%CP + 6 mg/mLMnO 2 ; CP22% + 10MnO 2 –22%CP + 10 mg/mLMnO 2 applied for 2 h for 15 days. Color change—CC (ΔE 00 and ΔWI D ) ( n = 8) was determined at 5, 10, and 15‐day periods (ANOVA/Sidak). Trans‐amelodentinal cytotoxicity (TC) was assessed after applying the extracts to cultured MDPC‐23 cells, which were analyzed concerning their viability (Vi) ( n = 8) and oxidative stress (OxS) ( n = 8). The amount of hydroxyl radical (OH • ) ( n = 4) generated by H 2 O 2 degradation (ANOVA/Sidak), and trans‐amelodentinal diffusion of H 2 O 2 ( n = 8) (ANOVA/Tukey) were also evaluated. Results CP22 + 10MnO 2 presented higher CC than CP22 for both evaluated equations in all analysis periods ( p ≤ 0.04). Among bleached groups, CP22 + 10MnO 2 presented the highest OH • generation ( p ≤ 0.02) and the lowest trans‐amelodentinal diffusion of H 2 O 2 ( p ≤ 0.0004). Therefore, MDPC‐23 cells in CP22 + 10MnO 2 exhibited the lowest OxS ( p < 0.0001) and consequently the highest Vi ( p ≤ 0.0146). Conclusion Besides increasing the bleaching efficacy, the strategy of adding 10 mg/mL of MnO 2 to a 22%CP bleaching gel also reduces significantly the trans‐amelodentinal diffusion of H 2 O 2 , diminishing the cytotoxicity caused by at‐home bleaching therapy. Clinical Significance The addition of MnO 2 to a 22% carbamide peroxide bleaching gel improves the color change and reduces the cytotoxicity effects of the product, making at‐home bleaching faster and biologically safer.