Background— The adenosine diphosphate (ADP) receptor P2Y 12 plays a pivotal role in platelet aggregation, as demonstrated by the benefit conferred by its blockade in patients with cardiovascular disease. Some studies have shown interindividual differences in ADP-induced platelet aggregation responses ex vivo, but the mechanisms underlying this variability are unknown. Methods and Results— We examined ADP-induced platelet aggregation responses in 98 healthy volunteers, and we identified 2 phenotypic groups of subjects with high and low responsiveness to 2 μmol/L ADP. This prompted us to screen the recently identified G i -coupled ADP receptor gene P2Y 12 for sequence variations. Among the 5 frequent polymorphisms thus identified, 4 were in total linkage disequilibrium, determining haplotypes H1 and H2, with respective allelic frequencies of 0.86 and 0.14. The number of H2 alleles was associated with the maximal aggregation response to ADP in the overall study population ( P =0.007). Downregulation of the platelet cAMP concentration by ADP was more marked in 10 selected H2 carriers than in 10 noncarriers. Conclusions— In healthy subjects, ADP-induced platelet aggregation is associated with a haplotype of the P2Y 12 receptor gene. Given the crucial role of the P2Y 12 receptor in platelet functions, carriers of the H2 haplotype may have an increased risk of atherothrombosis and/or a lesser clinical response to drugs inhibiting platelet function.

Coronavirus disease-2019 (COVID-19), a respiratory disease has been associated with ischemic complications, coagulation disorders, and an endotheliitis. To explore endothelial damage and activation-related biomarkers in COVID-19 patients with criteria of hospitalization for referral to intensive care unit (ICU) and/or respiratory worsening. Analysis of endothelial and angiogenic soluble markers in plasma from patients at admission. Study enrolled 40 consecutive COVID-19 patients admitted to emergency department that fulfilled criteria for hospitalization. Half of them were admitted in conventional wards without any ICU transfer during hospitalization; whereas the 20 others were directly transferred to ICU. Patients transferred in ICU were more likely to have lymphopenia, decreased SpO2 and increased D-dimer, CRP and creatinine levels. In those patients, soluble E-selectin and angiopoietin-2 were significantly increased (p value at 0.009 and 0.003, respectively). Increase in SELE gene expression (gene coding for E-selectin protein) was confirmed in an independent cohort of 32 patients using a whole blood gene expression profile analysis. In plasma, we found a strong association between angiopoetin-2 and CRP, creatinine and D-dimers (with p value at 0.001, 0.001 and 0.003, respectively). ROC curve analysis identified an Angiopoietin-2 cut-off of 5000 pg/mL as the best predictor for ICU outcome (Se = 80.1%, Sp = 70%, PPV = 72.7%, NPV = 77%), further confirmed in multivariate analysis after adjustment for creatinine, CRP or D-dimers. Angiopoietin-2 is a relevant predictive factor for ICU direct admission in COVID-19 patients. This result showing an endothelial activation reinforces the hypothesis of a COVID-19-associated microvascular dysfunction.

Edoxaban is a direct oral anticoagulant available in Europe but not in France. Given the high tourist traffic in France, understanding the pharmacology of edoxaban and the availability of its laboratory testing seemed crucial in emergency situations. The aim of this work was to describe the methodology for measuring the anti-Xa activity of edoxaban, highlighting pre-analytical and analytical aspects, along with essential clinico-biological data for therapeutic guidance. The analysis was performed using the chromogenic method on the STAR-Max analyzer, with the STA®-Liquid ANTI-Xa kit (Diagnostica Stago®). Anti-Xa Edoxaban level measurement has a detection limit of 15 ng/mL, a quantification limit of 20 ng/mL and a linearity limit of 400 ng/mL. Repeatability, intermediate precision, accuracy, and measurement uncertainty studies were conducted to assess method performance, meeting quality requirements. The comparison between two STAR-Max® analyzers showed excellent results with linear regression and a low bias with good precision and no loss of dispersion regardless of edoxaban levels. In conclusion, although the measurement of edoxaban level may be rarely necessary in clinical practice, its implementation is straightforward. The availability of edoxaban in neighboring countries, underscores the importance of having its measurement available in hospital laboratories.

Abstract The protease-activated receptor 1 (PAR1) and its activator thrombin re-ceptor activator peptide 6 (TRAP6) play crucial roles in various physiologi-cal and pathological processes, including hemostasis, thrombosis, and cancer progression. Although the interaction between PAR1 and TRAP6 has been heavily studied using experimental technique such as mutagenesis, structural data remains scarce due to the technical hardship of studying membrane pro-teins such as PAR1. In this study, we employed an integrative modeling approach to elucidate the structure of the PAR1-TRAP6 complex. Leveraging state-of-the-art AI-based protein modeling tools, including AlphaFold2 and ESMFOLD, we in-tegrated HADDOCK, a physics-based method to refine predictions. Overall, the predicted structures are in good agreement with the experimental data available in the literature. Our model unveiled a new T-shaped pi-stacking interaction between TRAP6’s F2 and PAR1’s Y360. The integrative modeling approach combining the predictions of the deep learning model with a physics-based method proves to be an interesting strat-egy for solving challenging membrane protein structures with high confidence. Our model of the PAR1-TRAP6 complex will be an interesting starting point for further investigation of the activation of PAR1 by TRAP6.