Mycophenolic acid (MPA) is an immunosuppressant widely used in transplantations, for which therapeutic drug monitoring (TDM) has proven beneficial. There is furthermore a need to develop affordable, rapid, and benchtop analytical methods to perform TDM of MPA in a point-of-need setting. In this paper, we report for the first time the Raman fingerprint region and surface-enhanced Raman spectroscopy (SERS) vibrations of MPA through density functional theory calculations. The output of these simulations was compared with experimental data from electrochemically assisted SERS, i.e. application of a well-defined potential or sequence of potentials in SERS assays. The systematic electrochemically assisted SERS experimental study was carried out to understand the adsorption behaviour of MPA on gold nanopillars (AuNPs) when different potentials were applied. We found that MPA interacts with the AuNPs through its benzofuran heterocycle and carboxylic acid group. Applying different potentials on the SERS substrate resulted in band shifts, which we hypothesise to originate from molecular reorientation on the metal surface. Moreover, an electrochemically assisted SERS assay was developed and carried out on a portable Raman spectrometer. We show that MPA detection can be performed in less than 5 min in a clinically relevant concentration range (1 – 50 µM), with improved repeatability compared to a SERS assay without any applied potential (overall RSD decrease from 34.6 % to 18.5 %).

We present the synthesis of a cross-linking enzyme aggregate (CLEAS) of a peroxidase from Megathyrsus maximus (Guinea Grass) (GGP). The biocatalyst was produced using 50%v/v ethanol and 0.88%w/v glutaraldehyde for 1 h under stirring. The immobilization yield was 93.74% and the specific activity was 36.75 U mg−1. The biocatalyst surpassed by 61% the free enzyme activity at the optimal pH value (pH 6 for both preparations), becoming this increase in activity almost 10-fold at pH 9. GGP-CLEAS exhibited a higher thermal stability (2–4 folds) and was more stable towards hydrogen peroxide than the free enzyme (2–3 folds). GGP-CLEAS removes over 80% of 0.05 mM indigo carmine at pH 5, in the presence of 0.55 mM H2O2 after 60 min of reaction, a much higher value than when using the free enzyme. The operational stability showed a decrease of enzyme activity (over 60% in 4 cycles), very likely related to suicide inhibition.