A polymorphism in the promoter of the UDP-glucuronosyltransferase 1 ( UGT1A1 ) gene has been shown to cause Gilbert syndrome, a benign form of unconjugated bilirubinemia. Promoters containing seven thymine adenine (ta) repeats have been found to be less active than the wild-type six repeats, and the serum bilirubin levels of persons homozygous or even heterozygous for seven repeats have been found to be higher than those with the wild-type six repeats. We have now examined the genotypes in persons of Asian, African, and Caucasian ancestry. Although within the Caucasian ethnic group there is a strong correlation between promoter repeat number and bilirubin level, between ethnic groups we found that this relationship to be inverse. Among people of African ancestry there are, in addition to those with six and seven repeats, also persons who have five or eight repeats. Using a reporter gene we show that there is an inverse relationship between the number of ta repeats and the activity of the promoter through the range of 5–8 ta repeats. An incidental finding was a polymorphism at nucleotide −106, tightly linked to the (ta) 5 haplotype. Serum bilirubin levels are influenced by many factors, both genetic and environmental. We suggest that the unstable UGT1A1 polymorphism may serve to “fine-tune” the plasma bilirubin level within population groups, maintaining it at a high enough level to provide protection against oxidative damage, but at a level that is sufficiently low to prevent kernicterus in infants.

Background There has been much interest in screening populations for disease-associated mutations. A favoured candidate has been the HFE gene, mutations of which are the most common cause of haemochromatosis in the European population. About five people in 1000 are homozygotes for the 845G→A mutation, but little is known of how many have mutation-caused clinical manifestations. Methods We screened 41 038 individuals attending a health appraisal clinic in the USA for the 845G→A and 187C→G HFE mutations, and analysed laboratory data and data on signs and symptoms of haemochromatosis as elicited by questionnaire. Findings The most common symptoms of haemo-chromatosis, including poor general health, diabetes, arthropathies, arrhythmias, impotence, and skin pigmentation were no more prevalent among the 152 identified homozygotes than among the controls. The age distribution of homozygotes and compound heterozygotes did not differ significantly from that of controls: there was no measurable loss of such individuals from the population during ageing. However, there was a significantly increased prevalence of a history of hepatitis or “liver trouble” among homozygotes and in the proportion of homozygotes with increased concentrations of serum aspartate amino-transferase and collagen IV; these changes were not related to iron burden or to age. Only one of the 152 homozygotes had signs and symptoms that would suggest a diagnosis of haemochromatosis. Interpretation The normal age distribution of people with the haemochromatosis genotype, and the lack of symptoms in patients of all ages, indicate that the penetrance of hereditary haemochromatosis is much lower than generally thought. The clinical penetrance of a disorder is an essential consideration in screening for genetic disease; disorders with low penetrance are more expensive candidates for screening than disorders with high penetrance. Our best estimate is that less than 1% of homozygotes develop frank clinical haemochromatosis.

Hepcidin, a liver-derived protein that restricts enteric iron absorption, is the key regulator of body iron content. Several proteins induce expression of the hepcidin-encoding gene Hamp in response to infection or high levels of iron. However, mechanism(s) of Hamp suppression during iron depletion are poorly understood. We describe mask : a recessive, chemically induced mutant mouse phenotype, characterized by progressive loss of body (but not facial) hair and microcytic anemia. The mask phenotype results from reduced absorption of dietary iron caused by high levels of hepcidin and is due to a splicing defect in the transmembrane serine protease 6 gene Tmprss6 . Overexpression of normal TMPRSS6 protein suppresses activation of the Hamp promoter, and the TMPRSS6 cytoplasmic domain mediates Hamp suppression via proximal promoter element(s). TMPRSS6 is an essential component of a pathway that detects iron deficiency and blocks Hamp transcription, permitting enhanced dietary iron absorption.

The British Journal of Haematology publishes original research papers in clinical, laboratory and experimental haematology. The Journal also features annotations, reviews, short reports, images in haematology and Letters to the Editor.

Hepcidin is a peptide that regulates iron homeostasis by inhibiting iron absorption by the small intestine and release of iron from macrophages. Its production is stimulated by iron overload and by inflammation. It has been suggested that IL-6 is the only cytokine that stimulates hepcidin transcription. However, mice with targeted disruption of the gene encoding IL-6 (IL-6-/-) respond to endotoxin by increasing the expression of hepcidin transcripts in the liver. We show that incubating murine hepatocytes with IL-6, IL-1alpha, and IL-1beta strongly stimulates hepcidin transcription. IL-10 has little or no stimulatory effect, and IFN-beta inhibits transcription of hepcidin. All of the hepcidin stimulatory activity of macrophages from IL-6-/- mice can be accounted for by IL-1 that they secrete. Hepatocytes from IL-6-/- mice, hfe-/- mice, and mice with a hypomorphic transferrin receptor 2 mutation responded to IL-6 and IL-1 by up-regulating hepcidin transcription. Nitric oxide does not seem to be involved in the stimulation of hepcidin transcription by cytokines: aminoguanidine does not inhibit the stimulation of hepcidin transcription by cytokines. IL-1 may play a significant role in the anemia of inflammation by up-regulating hepcidin.

2-Chlorodeoxyadenosine is a simple purine nucleoside that has previously been shown to be effective in the treatment of low-grade malignant disorders of lymphoid tissue, including chronic lymphocytic leukemia and non-Hodgkin's lymphoma. Because of these encouraging results, we treated 12 patients with another low-grade B-cell neoplasm, hairy-cell leukemia. The patients received 2-chlorodeoxyadenosine (0.1 mg per kilogram of body weight per day) by continuous infusion for seven days.

Ohno has shown that in somatic cells of human females, the two X-chromosomes are not alike. One behaves in exactly the same manner as the autosomes, remaining in an extended state during interphase and prophase, while the other assumes a heavily condensed state, forming the Barr sex chromatin body. In male somatic cells, on the other hand, the single X never manifests positive heteropycnosis; it always appears fine and elongated. It seemed to us entirely possible that the female X which condenses during interphase is genetically inactive. The active chromosome could not always be derived either from the mother or from the father, since this would give a pattern of inheritance of sex-linked mutations quite different from the pattern as we know it to exist. It seems necessary, therefore, to assume that there is, at least for some period of time during development, randomization of the active and inactive chromosome among the dividing cells of the body. Women would then be composed of a mosaic of cells, some with a functional paternal X-chromosome, others with a functional maternal X-chromosome. Glucose-6-phosphate dehydrogenase (g-6-pd) deficiency, an inborn error of metabolism of humans,9 represents an ideal test system in which to examine this hypothesis. Many heterozygous females with this disorder have red cell g-6-pd levels which are approximately 50 per cent of normal. If the precursors of a heterozygous female's erythrocytes were, as our hypothesis suggests, a mosaic consisting of some cells with the maternial X-chromosome active, others with the paternal X

Gaucher disease is a lysosomal storage disorder caused by deficient lysosomal β-glucosidase (β-Glu) activity. A marked decrease in enzyme activity results in progressive accumulation of the substrate (glucosylceramide) in macrophages, leading to hepatosplenomegaly, anemia, skeletal lesions, and sometimes CNS involvement. Enzyme replacement therapy for Gaucher disease is costly and relatively ineffective for CNS involvement. Chemical chaperones have been shown to stabilize various proteins against misfolding, increasing proper trafficking from the endoplasmic reticulum. We report herein that the addition of subinhibitory concentrations (10 μM) of N -( n -nonyl)deoxynojirimycin (NN-DNJ) to a fibroblast culture medium for 9 days leads to a 2-fold increase in the activity of N370S β-Glu, the most common mutation causing Gaucher disease. Moreover, the increased activity persists for at least 6 days after the withdrawal of the putative chaperone. The NN-DNJ chaperone also increases WT β-Glu activity, but not that of L444P, a less prevalent Gaucher disease variant. Incubation of isolated soluble WT enzyme with NN-DNJ reveals that β-Glu is stabilized against heat denaturation in a dose-dependent fashion. We propose that NN-DNJ chaperones β-Glu folding at neutral pH, thus allowing the stabilized enzyme to transit from the endoplasmic reticulum to the Golgi, enabling proper trafficking to the lysosome. Clinical data suggest that a modest increase in β-Glu activity may be sufficient to achieve a therapeutic effect.

We report the sequence of the entire human gene encoding β-glucocerebrosidase and that of the associated pseudogene. The gene contains 11 exons extending from base pair 355 to base pair 7232 in the overall sequence. The gene promoter contains TATA-and CAT-like boxes upstream of the major 5′ end of the glucocerebrosidase RNA. The two TATA boxes lie between nucleotides (−23)–(−27) and (−33)–(−39) and the two possible CAT boxes reside between nucleotides (−90)–(−94) and (−96)–(−99) in relation to the major 5′ end of the mRNA. The functionality of the promoter region was monitored by coupling it to the bacterial gene coding for chloramphenicol acetyltransferase (CAT) and assaying the expression of the enzyme in cells transfected with this vector. The glucocerebrosidase promoter not only directs synthesis of the bacterial enzyme but also exhibits the same pattern of tissue-specific expression as that of the endogenous gene. An apparently tightly linked pseudogene is approximately 96% homologous to the functional gene. However, introns 2, 4, 6, and 7 have large “deletions” consisting of Alu sequences 313, 626, 320, and 277 bp in length, respectively. It is entirely possible that the ancestral gene lacks these sequences and that they have been inserted into the introns of the functioning gene. There is also a 55-bp deletion from a part of exon 9 flanked by a short inverted repeat. The sequence data should facilitate development of methods for diagnosis of Gaucher disease at the molecular level.