ABSTRACT Bacterial infections of the lungs of cystic fibrosis (CF) patients cause major complications in the treatment of this common genetic disease. Burkholderia cenocepacia infection is particularly problematic since this organism has high levels of antibiotic resistance, making it difficult to eradicate; the resulting chronic infections are associated with severe declines in lung function and increased mortality rates. B. cenocepacia strain J2315 was isolated from a CF patient and is a member of the epidemic ET12 lineage that originated in Canada or the United Kingdom and spread to Europe. The 8.06-Mb genome of this highly transmissible pathogen comprises three circular chromosomes and a plasmid and encodes a broad array of functions typical of this metabolically versatile genus, as well as numerous virulence and drug resistance functions. Although B. cenocepacia strains can be isolated from soil and can be pathogenic to both plants and man, J2315 is representative of a lineage of B. cenocepacia rarely isolated from the environment and which spreads between CF patients. Comparative analysis revealed that ca. 21% of the genome is unique in comparison to other strains of B. cenocepacia , highlighting the genomic plasticity of this species. Pseudogenes in virulence determinants suggest that the pathogenic response of J2315 may have been recently selected to promote persistence in the CF lung. The J2315 genome contains evidence that its unique and highly adapted genetic content has played a significant role in its success as an epidemic CF pathogen.

The current pandemic SARS-CoV-2 has wreaked havoc in the world, and neither drugs nor vaccine is available for the treatment of this disease. Thus, there is an immediate need for novel therapeutics that can combat this deadly infection. In this study, we report the therapeutic assessment of azurin and its peptides: p18 and p28 against the viral structural S-protein and non-structural 3CLpro and PLpro proteins. Among the analyzed complexes, azurin docked relatively well with the S2 domain of S-protein compared to the other viral proteins. The derived peptide p18 bound to the active site domain of the PLpro protein; however, in other complexes, lesser interactions were recorded. The second azurin derived peptide p28, fared the best among the docked proteins. p28 interacted with all the three viral proteins and the host ACE-2 receptor by forming several electrostatic and hydrogen bonds with the S-protein, 3CLpro, and PLpro. MD simulations indicated that p28 exhibited a strong affinity to S-protein and ACE-2 receptor, indicating a possibility of p28 as a protein-protein interaction inhibitor. Our data suggest that the p28 has potential as an anti-SARS-CoV-2 agent and can be further exploited to establish its validity in the treatment of current and future SARS-CoV crisis.

ABSTRACT Pneumococcal infections have increasingly high mortality rates despite the availability of vaccines and antibiotics. The increase of bacterial resistance to antibiotics urges the discovery of new alternative therapeutics. Therefore, the identification of new virulence determinants, and the understanding of the molecular mechanisms behind pathogenesis and pneumococcal-host interactions has become of paramount importance in the search of new targets for drug development. The exoribonuclease RNase R has been involved in virulence in a growing number of pathogens. In this work, we have used Galleria mellonella as an infection model to demonstrate that the presence of ribonuclease R increases the pneumococcus virulence. Although the absence of RNase R does not affect exponential growth, the ability of the RNase R deleted strain to replicate in the hemolymph is compromised. Larvae infected with the RNase R mutant strain show an increased expression level of antimicrobial peptides, and have a lower bacterial load in the haemolymph in the later stages of infection, leading to a higher survival rate. Interestingly RNase R carrying pneumococci suffer a sudden drop in bacterial numbers immediately after infection, resembling the eclipse phase observed after intravenous inoculation in mice. Together our results suggest that RNase R might be involved in the ability of pneumococci to evade the host immune response, probably by interfering with internalisation and/or replication inside the larval hemocytes.