The variable portion of an immunoglobulin heavy chain gene is assembled from at least three discontinuous segments of DNA, the V, D and J regions. We have characterized a 30 kb segment of the human genome that plays a critical role in the formation of this variable region as well as in the expression of the two heavy chains that appear earliest in immunocyte ontogeny, the μ and δ chains. This region encodes nine J-like segments, an interspersed D segment, recombination signals and the genes responsible for the production of both μ and δ heavy chains. Six of the nine germline J-like genes appear to be active and easily account for most of the known human heavy chain amino acid sequences. Three of the J-like genes are pseudogenes. The large number of human J region genes and, hence, their greater potential for generating diversity as compared to the that of the mouse J region genes appears to result from recent genetic duplications. To assess this potential, we have analyzed two recombinant genes involving this region. One of these, a V—D—J recombinant, is likely to be an active gene; the other, an aberrant D—J recombinant. A comparison of the structures of these D regions raises the possibility that they are mosaics formed by recombination between D segments.

We report intriguing aspects of the contribution of IL-15Rα to IL-15 functions. Consistent with high-affinity interactions between IL-15 and IL-15Rα, these two molecules form stable complexes on the cell surface of activated monocytes. The formation of IL-15/IL-15Rα complexes on cell surfaces induces a trans-endosomal recycling of IL-15 leading to the persistence of surface-bound IL-15 due to the constantreappearance of IL-15 on plasma membranes. This complex contributes to the long survival of T cells expressing IL-15Rα after IL-15 withdrawal. Finally, these complexes on activated monocytes present IL-15 in trans to target cells such as CD8+ T cells that express only IL-2/15Rβ and γc upon cell-cell interaction.

Central memory CD8 + T cells (T CM ) and effector memory CD8 + T cells (T EM ) are found in humans and mice; however, their relative contributions to host immunity have only recently been examined in vivo . Further, the ability of T CM to treat an established tumor or infection has yet to be evaluated. To address the therapeutic potential of different tumor-reactive CD8 + T cell memory subsets, we used an established model for the in vitro generation of T CM and T EM by using IL-15 and IL-2, respectively. Adoptively transferred T CM exhibited a potent in vivo recall response when combined with tumor-antigen vaccination and exogenous IL-2, leading to the eradication of large established tumors. By contrast, T EM were far less effective on a per-cell basis. Microarray analysis revealed that the signature of highly in vivo effective antitumor T cells included the overexpression of genes responsible for trafficking to secondary lymphoid tissues. This gene expression profile correctly predicted the in vitro and in vivo lymphoid-homing attributes of tumor-reactive T cells. Furthermore, we found that homing to secondary lymphoid tissue is required for optimal tumor treatment. Our findings indicated that highly in vivo effective antitumor T cells were those that initially targeted secondary lymphoid tissue, rather than tumor sites, as had previously been postulated. Thus, tumor-reactive CD8 + T cell populations with the phenotypic and functional attributes of T CM may be superior to T EM /effector T cells for adoptive immunotherapies using concomitant tumor-antigen vaccination.

RNA sequencing of Burkitt lymphoma tumours allows identification of mutations affecting the transcription factor TCF3, its negative regulator ID3 and the cell cycle regulator CCND3; these pathways reveal new targets for potential therapeutic intervention. Although intensive chemotherapy can cure Burkitt’s lymphoma, the associated toxicity means that this treatment is not suitable for more vulnerable patients, such as the elderly or people in developing countries with the endemic form of the disease. This study identifies mutations of the transcription factor TCF3 or its negative regulator ID3 in a high percentage of sporadic cases of Burkitt’s lymphoma and suggests several novel drug targets, including PI(3) kinase and its downstream pathways, B-cell-receptor signalling and cyclin D3/CDK6. Burkitt’s lymphoma (BL) can often be cured by intensive chemotherapy, but the toxicity of such therapy precludes its use in the elderly and in patients with endemic BL in developing countries, necessitating new strategies1. The normal germinal centre B cell is the presumed cell of origin for both BL and diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL), yet gene expression analysis suggests that these malignancies may use different oncogenic pathways2. BL is subdivided into a sporadic subtype that is diagnosed in developed countries, the Epstein–Barr-virus-associated endemic subtype, and an HIV-associated subtype, but it is unclear whether these subtypes use similar or divergent oncogenic mechanisms. Here we used high-throughput RNA sequencing and RNA interference screening to discover essential regulatory pathways in BL that cooperate with MYC, the defining oncogene of this cancer. In 70% of sporadic BL cases, mutations affecting the transcription factor TCF3 (E2A) or its negative regulator ID3 fostered TCF3 dependency. TCF3 activated the pro-survival phosphatidylinositol-3-OH kinase pathway in BL, in part by augmenting tonic B-cell receptor signalling. In 38% of sporadic BL cases, oncogenic CCND3 mutations produced highly stable cyclin D3 isoforms that drive cell cycle progression. These findings suggest opportunities to improve therapy for patients with BL.

Original Article from The New England Journal of Medicine — Qualitative Analysis of Immune Function in Patients with the Acquired Immunodeficiency Syndrome — Evidence for a Selective Defect in Soluble Antigen Recognition

The nature of the defect in patients with common variable hypogammaglobulinæmia has been investigated using a technique established to study terminal differentiation of B lymphocytes into immunoglobulin synthesising and secreting cells. The peripheral-blood lymphocytes from normal individuals had geometric mean synthetic rates of 1641 ng. for IgG, 1698 ng. for IgA, and 3715 ng. for IgM per 2×106 cells when cultured for seven days in the presence of pokeweed mitogen. In contrast, the lymphocytes from all 13 patients with hypogammaglobulinæmia studied synthesised and secreted less than 100 ng. of each class of immunoglobulin during this period. When lymphocytes from 5 of the 8 hypogammaglobulinæmic patients studied were co-cultured with normal lymphocytes and pokeweed mitogen, the synthesis of immunoglobulin by normal lymphocytes was depressed by 84 to 100%. A comparable suppression of immunoglobulin synthesis by normal lymphocytes was observed when they were co-cultured with purified thymus-derived lymphocytes (T cells) from a hypogammaglobulinæmic patient. In control studies, suppression of immunoglobulin synthesis was not seen when normal cells were co-cultured with lymphocytes from unrelated normal individuals or from patients with the Sezary syndrome, nor were they inhibited when incubated with purified T cells from normal individuals. In addition, no suppression of immuno-globulin synthesis by normal lymphocytes was observed when they were cultured in serum from the hypogammaglobulinæmic patients. Theses studies suggest that in some patients the disease common variable hypogammaglobulinæmia may be caused or perpetuated by an abnormality of regulatory T cells which act to suppress B-cell maturation and antibody production.

Cyclosporin A (CsA) is a potent immunosuppressive agent, now gaining wide application in human organ transplantation. The immunosuppressive activity of CsA is at least in part due to inhibition of lymphokine production by activated T lymphocytes. Specifically, inhibition of T-cell growth factor (TCGF; also designated interleukin 2) production appears to be an important pathway by which CsA impairs T-cell function. To define further both the specificity of CsA and the level at which it interferes with lymphokine gene expression, we have studied its effects on TCGF mRNA accumulation as well as TCGF gene transcription. These studies were performed with a cloned human leukemic T-cell line (Jurkat, subclone 32), which can be induced with phytohemagglutinin and phorbol 12-myristate 13-acetate to produce large amounts of TCGF. In these cells, high levels of TCGF mRNA were present in induced but not in uninduced Jurkat cells as judged by hybridization to a cloned human TCGF cDNA probe. CsA completely inhibited induced TCGF mRNA accumulation at concentrations of 0.3-1.0 microgram/ml, whereas low levels of appropriately sized TCGF mRNA were present at 0.01 microgram/ml. In nuclear transcription experiments, CsA inhibited the synthesis of TCGF transcripts in a dose-dependent manner with complete inhibition at a concentration of 1 microgram/ml. In contrast, CsA did not inhibit the expression of two other inducible genes, TCGF receptor and HT-3. Further, HLA gene expression was also less affected than TCGF in CsA-treated cells. These data suggest a relatively selective action of CsA on TCGF gene transcription.