Filamin C (encoded by the FLNC gene) is essential for sarcomere attachment to the plasmatic membrane. FLNC mutations have been associated with myofibrillar myopathies, and cardiac involvement has been reported in some carriers. Accordingly, since 2012, the authors have included FLNC in the genetic screening of patients with inherited cardiomyopathies and sudden death. The aim of this study was to demonstrate the association between truncating mutations in FLNC and the development of high-risk dilated and arrhythmogenic cardiomyopathies. FLNC was studied using next-generation sequencing in 2,877 patients with inherited cardiovascular diseases. A characteristic phenotype was identified in probands with truncating mutations in FLNC. Clinical and genetic evaluation of 28 affected families was performed. Localization of filamin C in cardiac tissue was analyzed in patients with truncating FLNC mutations using immunohistochemistry. Twenty-three truncating mutations were identified in 28 probands previously diagnosed with dilated, arrhythmogenic, or restrictive cardiomyopathies. Truncating FLNC mutations were absent in patients with other phenotypes, including 1,078 patients with hypertrophic cardiomyopathy. Fifty-four mutation carriers were identified among 121 screened relatives. The phenotype consisted of left ventricular dilation (68%), systolic dysfunction (46%), and myocardial fibrosis (67%); inferolateral negative T waves and low QRS voltages on electrocardiography (33%); ventricular arrhythmias (82%); and frequent sudden cardiac death (40 cases in 21 of 28 families). Clinical skeletal myopathy was not observed. Penetrance was >97% in carriers older than 40 years. Truncating mutations in FLNC cosegregated with this phenotype with a dominant inheritance pattern (combined logarithm of the odds score: 9.5). Immunohistochemical staining of myocardial tissue showed no abnormal filamin C aggregates in patients with truncating FLNC mutations. Truncating mutations in FLNC caused an overlapping phenotype of dilated and left-dominant arrhythmogenic cardiomyopathies complicated by frequent premature sudden death. Prompt implantation of a cardiac defibrillator should be considered in affected patients harboring truncating mutations in FLNC.

Abstract Funding Acknowledgements None. Introduction During cardiac development, the Notch, Hippo, and Wnt/β-catenin signalling pathways play a crucial role in the tuning of cardiomyocyte proliferation. The individual engagement of each of these pathways during the early postnatal life, however, is still unclear. Purpose We wanted to develop a method to visualize over time, both in vitro and in vivo, the topography of activation of the Notch, Wnt/β-catenin, and Hippo pathways and their crosstalk upon cardiomyocyte treatment with a series of pro-proliferative stimuli. Methods We obtained Adeno-Associated Virus (AAV) constructs expressing distinct fluorescent proteins (ECFP, GFP, mCherry, DsRed) under the control of promoters that are specifically activated downstream of the signalling cascades of interest (a synthetic promoter consisting of 12 CSL binding sites for Notch1, a synthetic promoter consisting of 8 TEAD binding sites for YAP, and a synthetic promoter containing 7 TCF/LEF1 binding sites for β-catenin). Results First, by high content microscopy we followed the time of the activation of the AAV vectors coding for fluorescent reporters, either alone or in combination. We observed that a crosstalk exists between Yap and Notch signalling in proliferating cardiomyocytes, as detected by the activation of their respective fluorescent reporters. We confirmed our data by gene expression analysis and co-immunoprecipitation using specific antibodies in fractionated cardiomyocyte extracts. Next, we observe that miR-1825, miR-199a-3p, and miR-590-3p – three pro-regenerative miRNAs in cardiomyocytes– specifically activate both Yap and Notch signalling. Finally we characterized the reporter systems in vivo, to dissect the intracellular signalling pathways that are active in the first week of postnatal life. Beta-catenin signalling was quite undetectable in any of the conditions tested. In contrast, both Notch and Yap showed significant activation, consistent with their role in regulating early postnatal cardiomyocyte proliferation. Conclusions The developed AAV-fluorescent reporters allow to efficiently and specifically visualize the pro-proliferative activation of Notch and Yap signalling both in vitro and in vivo. The results obtained are supportive of a crosstalk existing between Notch and Yap pathways in proliferating cardiomyocytes.

Abstract Purpose of Review Hot phases are a challenging clinical presentation in arrhythmogenic cardiomyopathy (ACM), marked by acute chest pain and elevated cardiac troponins in the absence of obstructive coronary disease. These episodes manifest as myocarditis and primarily affect young patients, contributing to a heightened risk of life-threatening arrhythmias and potential disease progression. This review aims to synthesize recent research on the pathophysiology, diagnostic challenges, and therapeutic management of hot phases in ACM. Recent Findings Hot phases have been linked to genetic mutations, particularly in desmosomal proteins such as Desmoplakin ( DSP ). Diagnostic challenges include differentiating hot phases from isolated acute myocarditis, through identification of red flags and a multimodal approach, including CMR, FDG-PET, endomyocardial biopsy and genetic testing. Emerging therapies, such as immunosuppressive and anti-inflammatory treatments, show promise in managing hot-phase episodes. Summary Hot phases in ACM present a significant risk for arrhythmias and disease progression, necessitating a comprehensive diagnostic and therapeutic management. A multimodal diagnostic approach is essential for accurate diagnosis, but further research is needed to refine these strategies and improve prognosis for affected patients.