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Zhihua Yu
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MicroRNA‐3061 downregulates the expression of PAX7/Wnt/Ca2+ signalling axis genes to induce premature ovarian failure in mice

Te Liu et al.Jun 3, 2024
Abstract The in‐depth mechanisms of microRNA regulation of premature ovarian failure (POF) remain unclear. Crispr‐cas9 technology was used to construct transgenic mice. The qPCR and Western blot was used to detect the expression level of genes. H&E staining were used to detect ovarian pathological phenotypes. We found that the expression levels of microRNA‐3061 were significantly higher in ovarian granulosa cells (OGCs) of POF mouse models than in controls. The miR‐3061 +/− /AMH‐Cre +/− transgenic mice manifested symptoms of POF. RNA‐Seq and luciferase reporter assay confirmed that the PAX7 was one of the target genes negatively regulated by microRNA‐3061 (miR‐3061–5p). Moreover, PAX7 mediated the expression of non‐canonical Wnt/Ca 2+ signalling pathway by binding to the motifs of promoters to stimulate the transcriptional activation of Wnt5a and CamK2a. In contrast, specific knock‐in of microRNA‐3061 in OGCs significantly downregulated the expression levels of PAX7 and inhibited the expression of downstream Wnt/Ca 2+ signalling pathway. We also discerned a correlation between the expression levels of mRNAs of the Wnt/Ca2+ signalling pathway and the levels of E2 and FSH in POF patients by examining gene expression in the follicular fluid‐derived exosomes of women. We confirmed that overexpression of microRNA‐3061 induced proliferative inhibition of OGCs and ultimately induced POF in mice by suppressing the transcription factor PAX7 and downregulating expression levels of its downstream Wnt/Ca 2+ signalling pathway genes.
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Neurokinin B in the yellowtail kingfish (Seriola lalandi) and its potential role in controlling reproduction

Zhenfang Tian et al.May 27, 2024
The neurokinin B (NKB) system acts as a crucial modulator in the regulation of reproduction and feeding in mammals, however limited information is available in teleosts regarding its potential role in reproductive functions. Herein, we have identified its encoding gene, namely tachykinin 3 (tac3), in the yellowtail kingfish. The full-length tac3 cDNA sequence was 372 bp in size and encoded a 123-aa preprohormone, including two mature peptides, NKB and NKF. Tissue distribution analysis showed that tac3 was primarily expressed in the intestine of yellowtail kingfish. During embryonic development, the highest mRNA levels of tac3 were observed at stage 4 (16-cell) and stage 14 (newly-hatched larva). The peak of tac3 transcript levels was also noticed at 30 days post-hatching during early ontogeny. The physiological effects of NKB and NKF on expression of brain and pituitary genes along with plasma hormones levels were further analyzed by intraperitoneal injection. NKB exerted a stimulatory effect on gnrh1, gnrh2, gnih, and kiss2r mRNA levels, but suppressed kiss1r, gnihr, gal, gh, lhβ, and fshβ mRNA levels. An evident increase was observed on transcript levels of gnrh1, gnrh2, kiss1, kiss2, gnih, and gnihr after NKF treatment, whereas kiss1r, kiss2r, gh, lhβ, and fshβ mRNA levels were down-regulated. Moreover, NKF, but not NKB, reduced serum estradiol levels, and both of these two peptides suppressed serum 11-keto testosterone levels. Taken together, our results provide preliminary evidence that the NKB system participates in the control of reproduction in yellowtail kingfish via acting on brain, pituitary and gonadal hormones.