Nanotechnology-based RNA interference (RNAi) offers a promising approach to pest control. However, current methods for producing RNAi nanopesticides are mainly implemented in a batch-to-batch manner, lacking consistent quality control. Herein, we present a microfluidic-based nanoplatform for RNA nanopesticide preparation using lipid nanoparticles (LNPs) as nanocarriers, taking advantage of the enhanced mass transfer and continuous processing capabilities of microfluidic technology. The dsRNA@LNPs were rapidly formed within seconds, which showed uniform size distribution, improved leaf wettability, and excellent dispersion properties. The delivery efficiency of dsRNA@LNPs was evaluated by targeting the chitin synthetase B (CHSB) gene ofSpodoptera exigua. The dsRNA@LNPs can effectively resist nuclease-rich midgut fluid degradation. Importantly, dsCHSB@LNPs exhibited increased mortality rates, significant reduction of larvae growth, and enhanced gene suppression efficiency. Therefore, a continuous nanoplatform for RNAi nanopesticide preparation is demonstrated by utilizing microfluidic technology, representing a new route to produce RNAi nanopesticides with enhanced quality control and might accelerate their practical applications.

Estrogen-related receptor α (ERRα) is dysregulated in many types of cancer and exhibits oncogenic activity by promoting tumorigenesis and metastasis of cancer cells. However, its defined role in renal cell carcinoma (RCC) has not been fully elucidated. To reveal the biological function of ERRα and determine the underlying regulatory mechanism in RCC, the quantitative proteomics analysis and mechanism investigation were conducted. The results demonstrated that ERRα promoted the proliferation and tumorigenesis of RCC cells by maintaining lysosome-dependent autophagy flux. ERRα inhibition impaired the transcriptional expression of LAMP2 and VAMP8 and blocked the fusion of autophagosomes with lysosomes, causing the impairment of the autophagy-lysosome pathway and tumor repression in RCC. Moreover, VHL mutant-induced hyperactive hypoxia signaling in RCC triggered p300/CBP-mediated acetylation at the DNA-binding domain of ERRα, and this acetylation promoted its affinity toward targeting DNA and Parkin-mediated ubiquitination and proteasome-dependent degradation. This regulatory model enhanced ERRα transactivation on the expression of LAMP2 and VAMP8, which then maintained autophagy flux and RCC progression. Pharmaceutical inhibition on ERRα acetylation-mediated autophagy-lysosome pathway led to growth repression and sunitinib sensitivity of RCC cells. Taken together, this study uncovered a novel regulatory mechanism of acetylation contributing to the transcriptional performance and the oncogenic role of ERRα in RCC progression by modulating the autophagy-lysosome pathway. These findings might provide a novel approach for the clinical diagnosis and resolution of sunitinib resistance of RCC.

Intracellular macromolecules have the ability to form membraneless compartments, such as vacuoles and hollow condensates, through liquid-liquid phase separation (LLPS) in order to adapt to changes in their environment. The development of artificial non-homogeneous compartments, such as multiphase hollow or multicavity condensates, has gained significant attention due to their potential to uncover the mechanisms underlying the formation of artificial condensates and biomolecular condensates. However, the complexity of design and construction has hindered progress, particularly in creating dynamic non-homogeneous compartments. In this study, we present a dynamic membraneless compartment using peptide-oligonucleotide conjugates derived from short elastin-like polypeptides (sELP-ONs), which undergo pH-mediated phase transition. Below pH 8.8, the microcompartment exists as microdroplets that transform into non-homogeneous hollow condensates above pH 8.8. Notably, these hollow condensates retain liquid properties and high molecular ordering, and effectively sequester guest molecules with a hollow condensed layer. Furthermore, our sELP-ON microcompartments exhibit a feedback-induced phase transition in response to environmental pH fluctuations generated by complex enzymatic reactions mimicking cellular metabolism, providing a novel dynamic model for creating biomimetic membraneless compartments.

The regulation of liquid–liquid phase separation in an in vitro reconstructed stress granule model is achieved by employing a triangular prism-shaped DNA nanostructure to spatially regulate the multivalency interactions between G3BP1 and total RNAs.