Abstract The bed bug (Cimex lectularius L.) is one of the most prolific and burdensome indoor pests, and suppression of bed bug populations is a global priority. Understanding bed bug behavior is important to the development of new tactics for their control. Major gaps exist in our understanding of how host cues, insecticide resistance, and exposure modality impact the repellency of formulated products to bed bugs. Here, we validate the use of a binary choice olfactometer for assessing bed bug repellency behaviors using N,N-diethyl-3-methylbenzamide (DEET) in a dose-dependent manner, while considering the role of host-associated stimuli (with vs. without CO2), exposure modality (olfactory vs. olfactory and contact), and resistance status (susceptible vs. resistant) on repellency. We observed that host-seeking insecticide-susceptible bed bugs were repelled only when olfactorily exposed to high concentrations of DEET. However, exposure to DEET by contact repelled insecticide-susceptible bed bugs at 100-fold lower dose of DEET. Further, we demonstrate for the first time that insecticide-resistant bed bugs were significantly more responsive to DEET than susceptible bed bugs. We conclude that the 2-choice olfactometer is an effective tool for assessing the behavioral responses of bed bugs to spatial and contact repellents.

Vector control is essential for eliminating malaria, a vector-borne parasitic disease responsible for over half a million deaths annually. Success of vector control programs hinges on community acceptance of products like long-lasting insecticide-treated nets (LLINs). Communities in malaria-endemic regions often link LLIN efficacy to their ability to control indoor pests such as bed bugs ( Cimex lectularius L. and Cimex hemipterus (F.)) (Hemiptera: Cimicidae). Despite this, little is known about the potential repellent effects and toxicity of LLINs to bed bugs. Herein, we demonstrate for the first time that commonly deployed LLINs lack olfactory and contact-based repellency to host-seeking C . lectularius from both insecticide-susceptible and insecticide-resistant populations. One LLIN (PermaNet Dual) was significantly attractive to both populations when exposed olfactorily, but not in contact assays, highlighting the complexity of bed bug-LLIN interactions. The insecticide resistant bed bugs experienced low mortality in 4 d of continuous exposure to LLINs. These results suggest that LLINs would likely not repel or eliminate bed bug infestations in malaria-endemic communities, further selecting for insecticide resistance and potentially disrupting vector control programs.