BackgroundMany patients with COVID-19 have been treated with plasma containing anti-SARS-CoV-2 antibodies. We aimed to evaluate the safety and efficacy of convalescent plasma therapy in patients admitted to hospital with COVID-19.MethodsThis randomised, controlled, open-label, platform trial (Randomised Evaluation of COVID-19 Therapy [RECOVERY]) is assessing several possible treatments in patients hospitalised with COVID-19 in the UK. The trial is underway at 177 NHS hospitals from across the UK. Eligible and consenting patients were randomly assigned (1:1) to receive either usual care alone (usual care group) or usual care plus high-titre convalescent plasma (convalescent plasma group). The primary outcome was 28-day mortality, analysed on an intention-to-treat basis. The trial is registered with ISRCTN, 50189673, and ClinicalTrials.gov, NCT04381936.FindingsBetween May 28, 2020, and Jan 15, 2021, 11558 (71%) of 16287 patients enrolled in RECOVERY were eligible to receive convalescent plasma and were assigned to either the convalescent plasma group or the usual care group. There was no significant difference in 28-day mortality between the two groups: 1399 (24%) of 5795 patients in the convalescent plasma group and 1408 (24%) of 5763 patients in the usual care group died within 28 days (rate ratio 1·00, 95% CI 0·93–1·07; p=0·95). The 28-day mortality rate ratio was similar in all prespecified subgroups of patients, including in those patients without detectable SARS-CoV-2 antibodies at randomisation. Allocation to convalescent plasma had no significant effect on the proportion of patients discharged from hospital within 28 days (3832 [66%] patients in the convalescent plasma group vs 3822 [66%] patients in the usual care group; rate ratio 0·99, 95% CI 0·94–1·03; p=0·57). Among those not on invasive mechanical ventilation at randomisation, there was no significant difference in the proportion of patients meeting the composite endpoint of progression to invasive mechanical ventilation or death (1568 [29%] of 5493 patients in the convalescent plasma group vs 1568 [29%] of 5448 patients in the usual care group; rate ratio 0·99, 95% CI 0·93–1·05; p=0·79).InterpretationIn patients hospitalised with COVID-19, high-titre convalescent plasma did not improve survival or other prespecified clinical outcomes.FundingUK Research and Innovation (Medical Research Council) and National Institute of Health Research.

ABSTRACT Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) remains one of the most challenging cancer to treat. Due to the asymptomatic nature of the disease and ineffective drug treatment modalities, the survival rate of PDAC patients remains one of the lowest. The recurrent genetic alterations in PDAC are yet to be targeted; therefore, identifying effective therapeutic combinations is desperately needed. Here, we performed an in vivo CRISPR screening in a clinically relevant patient-derived xenograft (PDX) model system to identify synergistic drug combinations for PDAC treatment. Our approach revealed protein arginine methyltransferase gene 5 (PRMT5) as a promising druggable candidate whose inhibition creates synergistic vulnerability of PDAC cells to gemcitabine. Genetic and pharmacological inhibition results indicate that of PRMT5 depletion results in synergistic cytotoxicity with Gem due to depleted replication protein A (RPA) levels and an impaired non-homology end joining (NHEJ) DNA repair. Thus, the novel combination creates conditional lethality through the accumulation of excessive DNA damage and cell death, both in vitro and in vivo . The findings demonstrate that unbiased genetic screenings combined with a clinically relevant model system is an effective approach in identifying synthetic lethal drug combinations for cancer treatment. STATEMENT of SIGNIFICANCE Identify synergistic drug combinations for PDAC is a significant unmet need. Through CRISPR screening, we discovered and validated that PRMT5 depletion creates synergistic vulnerability of PDAC cells to gemcitabine. Mechanistically, the combination impairs DNA repair, synergistic accumulation of DNA damage and cell death in vitro and in vivo .

ABSTRACT Here, we show that hypoxia drives especially long-lasting epithelial-mesenchymal transition (EMT) in pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) primarily through a positive-feedback histone methylation-MAPK signaling axis. We find that transformed cells preferentially undergo EMT in hypoxic tumor regions in multiple model systems and that hypoxia drives a cell-autonomous EMT in PDAC cells which, unlike EMT in response to growth factors, can last for weeks. We further demonstrate that hypoxia reduces histone demethylase KDM2A activity, suppresses PP2 family phosphatase expression, and activates MAPKs to post-translationally stabilize histone methyltransferase NSD2, leading to an H3K36me2-dependent EMT in which hypoxia-inducible factors play only a supporting role. This mechanism can be antagonized in vivo by combinations of MAPK inhibitors that may be effective in multi-drug therapies designed to target EMT.

ABSTRACT Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) remains one of the deadliest cancers. Uncovering mechanisms responsible for the heterogeneous clinical features of this disease is an essential step toward developing improved and more specific therapeutic approaches. Here, we sought to identify transcriptional regulators of aggressive PDAC growth through in vivo CRISPR screening of epigenetic and transcription factors in an orthotopic model. We identified the ISL LIM homeobox 2 ( ISL2 ) gene as a tumor suppressor whose depletion enhances the proliferation of human PDAC cells in vitro and in vivo and cooperates with activated KRAS to initiate PDAC in a murine model. Conversely, the upregulation of ISL2 expression through CRISPR-mediated locus-specific epigenetic editing results in reduced cell proliferation. Importantly, ISL2 is epigenetically silenced through DNA methylation in ~60% of PDAC tumors, which correlates with poor patient outcome. Functional studies showed that ISL2 loss rewires metabolic gene expression, and consequently potentiates oxidative phosphorylation while reducing glycolysis. This metabolic shift creates selective vulnerability to small molecule inhibitors of mitochondrial respiration and fatty acid oxidation. Collectively, these findings reveal ISL2 as a novel tumor suppressor whose inactivation drives metabolic reprogramming in an aggressive PDAC subset and point to potential therapeutic vulnerabilities in these tumors.