In our previous study, a chemical derivatization reagent named 5-(dimethylamino) naphthalene-1-sulfonyl piperazine (Dns-PP) was developed to enhance the chromatographic retention and the mass spectrometric response of free fatty acids (FFAs) in reversed-phase liquid chromatography coupled with electrospray ionization-mass spectrometry (RPLC-ESI-MS). However, Dns-PP exhibited strong preferences for long-chain FFAs, with limited improvement for short- or medium-chain FFAs. In this study, a new series of labeling reagents targeting FFAs were designed, synthesized, and evaluated. Among these reagents, Tmt-PP (N

Tetracycline (TC) is one of the most frequently detected antibiotics in environmental. Monitoring the concentration of TC is essential for understanding environmental fate of antibiotics. In this work, bimetallic N-doped carbon catalysts of M/Co@NC (M= Ni, Mn, Cu, Zn, Fe) were rationally synthesized via molten salt-assisted pyrolysis. The distinctive synergistic interplay between Cu and Co endowed Cu/Co@NC superior activation capacity for peroxymonosulphate (PMS). Inspired by the advantages of sulfate radical (SO4•−), an original colorimetric sensing platform was developed by using PMS as oxidant and rhodamine B(RhB) as chromogenic agents. Notably, this platform achieved an ultrafast visual reaction within 60 s and exhibited broad pH applicability under pH 2-9. Then, leveraging a competitive inhibition mechanism, dual-mode colorimetric and fluorescent sensing platforms were established for TC detection under neutral conditions. The fluorescent platform exhibited a reliable liner range from 0.001 to 15 μg/mL with limit of detection of 2 ng/mL. Excellent selectivity was found for TC even among different antibiotics. Theoretical calculations elucidated that the superior selectivity arises from a higher electrophilic attack (f -) of TC. Based on these finding, a smartphone-assisted test strip was developed and successfully deployed for the rapid monitoring of TC in practical water samples. This work not only synthesized an efficient PMS activator, but also proposed a novel visual sensing mode with ultrafast detection times, wide pH applicability and portable operation.

Brown adipose tissue (BAT) in rodents appears to be an important tissue for the clearance of plasma branched-chain amino acids (BCAAs) contributing to improved metabolic health. However, the role of human BAT in plasma BCAA clearance is poorly understood. Here, we evaluate patients with prostate cancer who underwent positron emission tomography-computed tomography imaging after an injection of

Abstract It is acknowledged that the bisecting N-acetylglucosamine (GlcNAc) structure, a GlcNAc linked to the core β-mannose residue via a β1,4 linkage, represents a special type of N-glycosylated modification and has been reported to be involved in various biological processes, such as cell adhesion and fetal development. Clark et al. has found that the majority of N-glycans in human trophoblasts bearing a bisecting GlcNAc. This type of glycan has been reported to help trophoblasts get resistant to natural killer (NK) cell-mediated cytotoxicity, and this would provide a possible explanation for the question how could the mother nourish a fetus within herself without rejection. Herein, we hypothesized that human amniotic membrane which is the last barrier for the fetus may also express bisecting type glycans to protect the fetus. To test this hypothesis, glycomic analysis of human amniotic membrane was performed, and the bisecting N-glycans with high abundance were detected. In addition, we re-analyzed our proteomic data with high fractionation and amino acid sequence coverage from human amniotic membrane, which had been released for the exploration of human missing proteins. The presence of bisecting GlcNAc peptides was revealed and confirmed. A total of 41 glycoproteins with 43 glycopeptides were found to possess a bisecting GlcNAc, 25 of which are for the first time to be reported to have this type of modification. These results provide the profiling of bisecting GlcNAc modification in human amniotic membrane and benefit to the function studies of glycoproteins with bisecting GlcNAc modification and the function studies in immune suppression of human placenta. The mass spectrometry placenta data are available via ProteomeXchange (PXD010630).

Abstract The majority of clinical deaths among patients with triple-negative breast cancer (TNBC) are caused by uncontrolled cell proliferation and aggressive metastases, which is regulated by hyperactive glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3β); however, the underlying mechanisms remain largely unknown. In the present study, we found that protein phosphatase 1 regulatory inhibitor subunit 14C (PPP1R14C) was specifically upregulated in TNBC, compared with that in normal tissues and non-TNBC. High PPP1R14C expression correlated significantly with shorter 5-year relapse-free survival and overall survival in patients with TNBC. Overexpressing PPP1R14C promoted, while suppression of PPP1R14C decreased the cell proliferation and the aggressive phenotype of TNBC cells, in vitro and in vivo . Importantly, we revealed that PPP1R14C interacted with and inactivated type 1 Ser/Thr protein phosphatase (PP1) to sustain GSK3β phosphorylation at S9, and induced the ubiquitylation and degradation of non-phosphorylated GSK3β (S9A) via recruiting E3 ligase, TRIM25. Furthermore, treating with C2 ceramide (C2), which recovered kinase activity of GSK3β, resulted in tumor growth inhibition in PPP1R14C-overexpressing TNBC cells. Our findings reveal a novel mechanism whereby PPP1R14C sustains inactive GSK3β, which might lead to targeted therapy for TNBC.

Hyperlipidemia is associated with many diseases and considered the main contributing factor in the development of metabolic syndrome. The traditional Mongolian medicine Dracocephalum moldavica L. (D. moldavica) is commonly consumed as a tea (non-Camellia tea) for the prevention and treatment of coronary heart disease, hypertension, atherosclerosis, and other diseases. Here, we attempted to investigate the hypolipidemic activity and mechanisms underlying the active components of D. moldavica. First, the mechanism underlying the lipid accumulation-reducing effects of the D. moldavica ethanol extract was determined using in vitro experiments, and four polar fractions were screened for activity. Then, the effect of the ethyl acetate fraction of D. moldavica (EAD) on lowering blood lipid was confirmed in vivo. The combination of network pharmacological and serum pharmacochemistry analyses showed that apigenin, luteolin, and naringenin of EAD existed in prototype form in the drug-containing serum of rats. We also determined the content of the three active ingredients in EAD. Finally, in vitro experiments showed that apigenin, luteolin, and naringenin improved oleic acid-induced lipid accumulation in HepG2 cells by regulating the PPAR signaling pathway (PPARα, CPT1, and FABP3). Our findings provide mechanistic insights and application prospects for the prevention and treatment of hypolipidemia using D. moldavica.

Abstract Trueperella pyogenes can cause severe pulmonary disease in swine, but the mechanism of pathogenesis is not well defined. T. pyogenes- induced damage to porcine bronchial epithelial cells (PBECs), porcine precision-cut lung slices (PCLS) and respiratory epithelium of mice remains unknown. In this study, we used T. pyogenes 20121 to infect PBECs in air-liquid interface conditions and porcine PCLS. T. pyogenes could adhere to, colonize and induce cytotoxic effect on PBECs and the luminal surface of bronchi in PCLS, which damaged the bronchiolar epithelium. Moreover, bronchiolar epithelial cells showed extensive degeneration in infected mice lungs. Furthermore, western blot showed the NOD-like receptor (NLR)/ C-terminal caspase recruitment domain (ASC)/caspase-1 axis and nuclear factor-kappa B (NF-κB) pathway were involved in inflammation in PCLS and lungs of mice, which also confirms PCLS provide a platform to analyze pulmonary immune response. Meanwhile, the levels of p-c-Jun N-terminal kinase (JNK), p-extracellular signal-regulated kinase (ERK) and p-protein kinase B (AKT) were increased significantly, which indicated the mitogen-activated protein kinase (MAPK) and Akt pathways were also involved of inflammation in T. pyogenes- infected mice. In addition, we used T. pyogenes 20121 to infect tumour necrosis factor alpha (TNF-α) -/- mice, the results indicated apoptosis and injury in respiratory epithelium of infected TNF-α -/- mice were alleviated. Thus, pro-inflammatory cytokine TNF-α played a role in apoptosis and respiratory epithelium injury of mice lungs. Collectively, our study provides an insight into the inflammatory injury induced by T. pyogenes , and suggests that blocking NLR or TNF-α may be a potential therapeutic strategy against T. pyogenes infection.

Colorectal cancer (CRC) is the second leading cause of cancer-related deaths worldwide. Despite extensive research, the mechanistic underpinnings driving CRC progression remain largely unknown. As a fundamental component of the brush border cytoskeleton, villin-1 (VIL1) acts as a marker for intestinal cell differentiation and maturation. Through a comprehensive transcriptomics analysis of eight studies (total sample: n = 1952), we consistently observed significant upregulation of VIL1 expression in CRC tumors compared with adjacent normal tissue. In our independent cohort, this notable upregulation has been further validated at both mRNA and protein levels in colon tumor tissues, relative not only to adjacent normal tissue but also to normal controls. Our data show that VIL1 promotes proliferation and migration while inhibiting apoptosis. Conversely, knockout of VIL1 suppresses proliferation and migration while inducing apoptosis. Mechanistically, we reveal that knocking out VIL1 activates ferroptosis and inhibits the migration of CRC cells, while overexpressing VIL1 yields the opposite effects, and vice versa. Additionally, VIL1 binds to Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit (NF-κB) and controls NF-κB expression. In vivo, overexpressing VIL1 inhibits ferroptosis, and induces the expression of NF-κB and lipocalin 2 (LCN2), thereby promoting CRC tumor growth. Thus, we have identified the VIL1/NF-κB axis as a pivotal regulator of CRC progression through ferroptosis modulation, unveiling VIL1 as a promising therapeutic target for CRC treatment via ferroptosis. Our study offers novel avenues for exploring the therapeutic potential of ferroptosis in CRC management, emphasizing the high potential of VIL1 in regulating colorectal tumorigenesis.