Hepatocyte transplantation and bioartificial liver (BAL) systems hold significant promise as less invasive alternatives to traditional transplantation, providing crucial temporary support for patients with acute and chronic liver failure. Although human hepatocytes are ideal, their use is limited by ethical concerns and donor availability, leading to the use of porcine hepatocytes in BAL systems due to their functional similarities. Recent advancements in gene-editing technology have improved porcine organ xenotransplantation clinical trials by addressing immune rejection issues. Gene-edited pigs, such as alpha-1,3-galactosyltransferase (GGTA1) knockout pigs, offer a secure source of primary cells for BAL systems. Our research focuses on optimizing the safety and functionality of porcine primary hepatocytes during large-scale cultivation. We achieved this by creating GGTA1 knockout pigs through one-step delivery of CRISPR/Cas9 to pig zygotes via oviduct injection of rAAV, and enhancing hepatocyte viability and function by co-culturing hepatocytes with Roof plate-specific spondin 1 overexpressing HUVECs (R-HUVECs). Using a Rocker culture system, approximately 10

The high strength and ductility Zn–Mn–Li alloys with heterogeneous lamellar (HL) structure were prepared by rotary swaging. Li(Mn,Zn)4 phase was identified as the matrix phase. Grain refinement and hetero-deformation induced strengthening. Grain sliding and activation of more pyramidal slip system increase the strain.

Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is characterized by persistent tissue injury, dysregulated wound healing, and extracellular matrix (ECM) deposition by myofibroblasts (MFs) through the fibroblast-to-myofibroblast transition (FMT). Implicit in the FMT process are changes in the ECM and cellular topology, but their relationship with the lung fibroblast phenotype has not been explored. We engineered topological mimetics of alignment cues (anisotropy/isotropy) using lung decellularized ECM micropattern arrays and investigated the effects of cellular topology on cellular fates in MRC-5 lung fibroblasts. We found that isotropic MRC-5 cells presented changes of the cytoskeleton, increased cell–cell adhesions and a multicellular architecture with increased overlap, changes in actin–myosin development, and enhanced focal adhesion and cell junction with random alignment. Besides, anisotropic fibroblasts were activated into a regular phenotype with an ECM remodeling profile. In contrast, isotropic fibroblasts developed a highly invasive phenotype expressing molecules, including CD274/programmed death-ligand 1 (PD-L1), cellular communication network factor 2 (CCN2)/connective tissue growth factor (CTGF), hyaluronan synthase 2 (HAS2), and semaphorin 7A (SEMA7A), but with downregulated matrix genes. Moreover, isotropic fibroblasts also showed higher expressions of Ki-67 and cyclin D1 (CCND1), resistance to apoptosis/senescence, and decreased autophagy. The topology regulated the cellular heterogeneity and resulted in positive feedback between changes in the cellular phenotype and the ECM structure, which may aggravate fibrosis and lead to a priming of malignant microenvironment during carcinogenesis. Using the versatile platform of micropattern array, we can not only visualize the interaction mechanism between cells and the ECM but also select potential clinical targets for diagnosis and therapeutics.