1. A new method has been developed for measuring the total antioxidant capacity of body fluids and drug solutions, based on the absorbance of the ABTS*+ radical cation. 2. An automated method for use on a centrifugal analyser, as well as a manual method, is described. 3. The procedure has been applied to physiological antioxidant compounds and radical-scavenging drugs, and an antioxidant ranking was established based on their reactivity relative to a 1.0 mmol/l Trolox standard. 4. The Trolox equivalent antioxidant capacity of plasma from an adult reference population has been measured, and the method optimized and validated. 5. The method has been applied to investigate the total plasma antioxidant capacity of neonates and how this may be compromised in prematurity.

AbstractThe relative antioxidant activities, against radicals generated in the aqueous phase, of a range of plant-derived polyphenolic flavonoids, constituents of fruit, vegetables, tea and wine, have been assessed. The results show that compounds such as quercetin and cyanidin, with 3′,4′ dihydroxy substituents in the B ring and conjugation between the A and B rings, have antioxidant potentials four times that of Trolox, the vitamin E analogue. Removing the ortho-dihydroxy substitution, as in kaempferol, or the potential for electron deloculisation by reducing the 2.3 double bond in the C ring, as in catechin and epicatechin, decreases the antioxidant activity by more than 50%. but these structures are still more effective than α-tocopherol or ascorbate. The relative significance of the positions and extents of hydroxylation of the A and B rings to the total antioxidant activity of these plant polyphenols is demonstrated.Key Words: flavonoid. polyphenolantioxidant activityanthocyanidin.

The purpose of this investigation was to establish the relative antioxidant activities in vitro of the flavanolic polyphenols, the catechins, and catechin-gallate esters. The relative antioxidant potentials were measured against radicals generated in the aqueous phase and against propagating lipid peroxyl radicals. The results show that in the aqueous phase their order of effectiveness as radical scavengers is epicatechin gallate (ECG) > epigallocatechin gallate (EGCG) > epigallocatechin (EGC) > gallic acid (GA) > epicatechin ≃ catechin; against propagating lipid peroxyl radical species, epicatechin and catechin are as effective as ECG and EGCG, the least efficacious being EGC and GA. This is consistent with their relative abilities to protect against consumption of LDL α-tocopherol. The results are discussed in the context of the most relevant antioxidant constituents of green tea extracts.

The purpose of this study was to assess the relative antioxidant activities of a range of carotenes and xanthophylls through the extent of their abilities to scavenge the ABTS ·+ radical cation. The results show that the relative abilities of the carotenoids to scavenge the ABTS ·+ radical cation are influenced by the presence of functional groups with increasing polarities, such as carbonyl and hydroxyl groups, in the terminal rings, as well as by the number of conjugated double bonds.

This chapter discusses the total antioxidant status in plasma and body fluids. Methods that have been developed for the measurement of the antioxidant activity of fluids are all essentially inhibition methods in which a free radical species is generated, there is an end point by which the presence of the radical is detected, and the antioxidant activity of the added sample inhibits the end point by scavenging the free radical. Methods vary greatly as to the radical that is generated, the reproducibility of the generation process, and the end point that is used. Currently, the telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay is the most widely used assay of antioxidant activity. Other methods are based on inhibition of spontaneous tissue autoxidation by antioxidants. Thermal decomposition of the water-soluble azo compound 2,2'-azobis(2-amidopropane) hydrochloride (ABAP) yields peroxyl radicals at a known and constant rate. Each molecule of Trolox, α-tocopherol, or other phenolic antioxidant traps two peroxyl radicals, giving Trolox a stoichiometric factor of 2.0 in the TRAP assay. Other pure antioxidants have different stoichiometric factors (ascorbate, 1.5; urate, 1.7), and these must be taken into account when extrapolating back to molar concentrations from TRAP values.

Recent studies are emphasising the importance and putative modes of action of specific flavonoids as bioactive components of the diet in in vivo and in vitro models. Thus, it is important to have a clear idea of the major phenolic families of which fruit and vegetables are comprised and the levels contained therein. Regularly consumed fruit and vegetables of mixed varieties available on the UK market were analysed for the composition of the major individual phenolic components. The total phenolic content (applying the Folin assay) and the vitamin C levels were also determined. The antioxidant capacities of aqueous/methanolic extracts were comparatively assessed using the TEAC (Trolox Equivalent Antioxidant Capacity), the FRAP (Ferric Reducing Ability of Plasma) and ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity) assays, which comprise contributions from polyphenols, simple phenols and the ascorbate component. The results were calculated in terms of 100 u g fresh weight (FW) uncooked portion sizes. Fruit and vegetables rich in anthocyanins (e.g. strawberry, raspberry and red plum) demonstrated the highest antioxidant activities, followed by those rich in flavanones (e.g. orange and grapefruit) and flavonols (e.g. onion, leek, spinach and green cabbage), while the hydroxycinnamate-rich fruit (e.g. apple, tomato, pear and peach) consistently elicited the lower antioxidant activities. The TEAC, FRAP and ORAC values for each extract were relatively similar and well-correlated with the total phenolic and vitamin C contents. The antioxidant activities (TEAC) in terms of 100 u g FW uncooked portion size were in the order: strawberry d raspberry=red plum d red cabbage>>>grapefruit= orange>spinach>broccoli>green grape ; onion> green cabbage>pea>apple> cauliflower ; pear> tomato ; peach=leek>banana ; lettuce.

The flavonoids constitute a large group of polyphenolic phytochemicals with antioxidant properties in vitro. The interactions of four structurally related flavonoids (quercetin, kaempferol, rutin and luteolin) with Cu2+ ions were investigated in terms of the extent to which they undergo complex formation through chelation or modification through oxidation, as well as in their structural dependence. The ortho 3ʹ,4ʹ-dihydroxy substitution in the B ring is shown to be important for Cu2+-chelate formation, thereby influencing the antioxidant activity. The presence of a 3-hydroxy group in the flavonoid structure enhances the oxidation of quercetin and kaempferol, whereas luteolin and rutin, each lacking the 3-hydroxy group, do not oxidize as readily in the presence of Cu2+ ions. The results also demonstrate that the reactivities of the flavonoids in protecting low-density lipoprotein (LDL) against Cu2+ ion-induced oxidation are dependent on their structural properties in terms of the response of the particular flavonoid to Cu2+ ions, whether chelation or oxidation, their partitioning abilities between the aqueous compartment and the lipophilic environment within the LDL particle, and their hydrogen-donating antioxidant properties.