The gut microbiome has been the center of attention for human commensal microbiome studies. The vaginal microbiome is also densely populated with bacteria, viruses and fungi, and the presence of microorganisms beyond the cervix is increasingly reported in non-infectious conditions 1–3 . Due to the over 90% of human sequences in female reproductive tract samples 3,4 , metagenomic information has been very limited. 16S rRNA gene amplicon sequencing studies have identified community types in the vaginal microbiota, and observed its dynamic changes due to menstrual cycles and sexual behaviors in small cohorts 5,6 . Here we perform metagenomic shotgun sequencing on cervical samples from 516 women of reproductive age (more than 10-fold of the Human Microbiome Project (HMP) 4 ), and dissect major factors, especially pregnancy and delivery histories and contraception methods on the microbiome composition. Features of other body sites, such as mood fluctuations and facial speckles could potentially be deduced from the vagino-cervical microbiome. Our results offer an unprecedented glimpse into the microbiota in the female reproductive tract and imply disease susceptibilities that may be relieved by behavioural changes.

Abstract The vaginal microbiota is presumably much simpler than the gut microbiome, and oral probiotics appear as a promising means to modulate its homeostasis in the general population. Here, 60 women were followed for over a year before, during and after a probiotic containing Lactobacillus rhamnosus GR-1 and L. reuteri RC-14. Shotgun metagenomic data of 1334 samples from multiple body sites did not support colonization of the probiotics to the vagino-cervical microbiome, yet the microbiome was stable in those dominated by Lactobacilli and some individuals have likely benefited from this medication-free intervention.

The oral cavity of each person is home for hundreds of bacterial species. While taxa for oral diseases have been well studied using culture-based as well as amplicon sequencing methods, metagenomic and genomic information remain scarce compared to the fecal microbiome. Here we provide metagenomic shotgun data for 3346 oral metagenomics samples, and together with 808 published samples, assemble 56,213 metagenome-assembled genomes (MAGs). 64% of the 3,589 species-level genome bins contained no publicly available genomes, others with only a handful. The resulting genome collection is representative of samples around the world and across physiological conditions, contained many genomes from Candidate phyla radiation (CPR) which lack monoculture, and enabled discovery of new taxa such as a family within the Acholeplasmataceae order. New biomarkers were identified for rheumatoid arthritis or colorectal cancer, which would be more convenient than fecal samples. The large number of metagenomic samples also allowed assembly of many strains from important oral taxa such as Porphyromonas and Neisseria. Predicted functions enrich in drug metabolism and small molecule synthesis. Thus, these data lay down a genomic framework for future inquiries of the human oral microbiome.

Human urine is traditionally considered to be sterile, and whether the urine harbours distinct microbial communities has been a matter of debate. The potential link between female urine and reproductive tract microbial communities is currently not clear. Here we collected the urine samples from 147 Chinese women of reproductive age, and explored the nature of colonization by 16S rRNA gene amplicon sequencing, real-time qPCR and live bacteria culture. To demonstrate utility intra-individual Spearman's correlation was used to explore the relationship between urine and multi-sites of the reproductive tract. PERMANOVA was also performed to explore potential correlations between the lifestyle and various clinical factors and urinary bacterial communities. Our data demonstrated distinct bacterial communities in urine, indicative of a non-sterile environment. Types of diverse, Streptococcus-dominated, and Lactobacillus-dominated were the three most common types in the cohort. Detailed comparison of the urinary microbiota to the multi-sites of reproductive tract microbiota demonstrated the urinary microbiota was more similar to the microbiota in the cervix and uterine cavity instead of vagina in the same women. Our data demonstrates the potential connectivity of the microbiota in the female urogenital system and provided insight into the exploration of urethra and genital tract diseases.### Competing Interest StatementThe authors have declared no competing interest.